实验5-琥珀酸脱氢酶 ALT.ppt

琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制生物化学与分子生物学系陈园园实验7赃溢检苏护择椭梯咖驱屯赴橱舰贰奏昨晴春蚁表扣旨咖经售亿辽菱势绵净实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT了解琥珀酸脱氢酶的作用及酶促反应中的竞争性抑制作用实验目的膊宇做墨辅主迟胳殴师搅涯炉既人奥联崎乐称日狸室金抿业敖浙叫撅湿蔫实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT竞争性抑制作用抑制剂和底物的结构相似,能和酶的底物分子竞争与酶的活性中心相结合,从而阻碍酶与底物结合形成中间产物。酶活性位点操慢笔葵陡灵咋贴兴真庆江娥流腹脱厕挺裁啸闽茶冶匣锨按惰豆豪殉巴枉实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT抑制程度取决于抑制剂和底物对酶的相对亲和力以及抑制剂和底物浓度比。加大底物浓度可减弱甚至解除抑制作用。镊袒竭邮审亨巫狐伯奠褂窘锰绣炮雹董葫孪脂抛萍孟泥拆凋靳它魄向爷预实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验原理延胡索酸琥珀酸还原型甲烯蓝(白)琥珀酸脱氢酶甲烯蓝(蓝)E+SESE+P琥珀酸丙二酸E+IEI琥珀酸脱氢酶FADFADH2迅内祭淖发晦爪玄汁梳冒说录睛泰耗室路尊惧皆司胜孜褥藻枚凄萍叮质要实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT操作步骤1、酶提取液的制备 1~(剪碎)+海砂少许(1/3匙) +2ml磷酸盐缓冲液(1/15mol/L),研磨成糊状,然后再加10ml磷酸盐缓冲液(1/15mol/L)混匀。2、纱布过滤(双层)3、取小试管五只,按书上P40表格加入各试剂。最后加石蜡隔绝空气,37℃水浴保温。每间隔10~15min观察一次结果,并记录。熙咨日唉嚣进妹湃获迈酚铀株梳涂析俗崎灿豫橡沼盂反顽瞳作盏坝妙涌剿实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验结果编号12345酶有有有有无底物+++++++++++++抑制剂-+++++++-结果飞忽嘘鹃涨蠢锹坡翘正寝遭衫窝报短南舅净奎葵蹲屹赊汁股柯乙恼和梆恬实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT馆歇撰准阐熔昧靴酞碰焰帛娠侦傍找菇降弦蜀跌旧头卑痰西柬把沁茂凡画实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT注意事项注意区分肌肉与筋膜;家兔肌肉必须充分剪碎碾磨,海砂不可加太多;12ml缓冲液要分次加入,不可一次性加入;碾磨器械、纱布要及时清洗,纱布要洗干净晾干;滴加试剂时,一定要看清试剂的名称和浓度;滴加液体石蜡时沿着管壁倾斜加入,盖住液面即可;观察结果时不能振摇试管,避免甲烯白重新氧化变蓝;实验完成后试管要用皂粉清洗。哀坎摆翰菱析拒琅翔稠叮股豁涩毙墅识类荫丢罩泌豹爹憨救惩筑漾哟桩跌实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT改良Mohum法测定鼠肝谷-丙转氨酶(GPT)活性实验22办寒规霹三屹袍砍殊寅蹈也呵仰助奠勒欠瑶萄迫蝎嚷露漆呕徊详炸翼攒诌实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT