白芷香豆素类成分的提取分离和鉴定.doc

白芷香豆素类成分的提取分离和鉴定.doc白芷香豆素类成分的提取分离和鉴定二、 实验目的淫习用冇机溶剂捉取香豆素类成分的方法。学习用柱层析色谱分离香豆素类化合物的方法。三、 实验操作(一)总提取物的制备取口芷生药粗粉200g,用石油瞇•内酮(4:1)冋流提取3次,毎次250ml,分别捉取2,l,lh,合并捉取液,回收溶剂至干,(-),用5g硅胶吸附,在25x4cm的色谱柱上干法上样,进行低压柱层析色谱。色谱条件:吸附剂:硅胶H20g(薄层色谱用)洗脱剂:石油醛丙酮8:1,6:1,4:1,3:1各80mlo压力:〜:5〜8ml/份用下述薄层色谱条件进行检识,将相同斑点的流分合并,用石油瞇■乙酸乙酯(&2)的溶剂重结品1〜2次,分别得到单体化合物,测定熔点。(三)鉴定1•薄层色谱吸附剂:硅胶(薄层色谱用)展开剂:(1)石油醛丙酮8:2;(2)苯•乙酸乙酯8:2样品:白芷总提取物,异欧前胡素,欧前胡素标准品:异欧前胡素,欧前胡素显色:紫外灯(365nm)下观察荧光。'H-NMR谱:用CDCb作为溶剂。一、 ; 、 实验原理白芷为伞型科植物白芷的干燥根。具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功能。白芷屮的冇效成分为香豆素类化合物。用单位白芷的提取物(英屮主要是香豆素类化合物)制成的制剂对功能性头痛、口瘢风的临床疗效较好。异欧丽胡素和欧前胡索为片芷的主要有效成分。常'见的提取方法有:溶剂提取法、水蒸气蒸谓法、升华法。其屮,溶剂提取法应用最广。溶剂提取法的原理:根据相似相溶原理,选择与化合物极性相当的溶剂将化合物从植物组织屮溶解出来,同时,由于某些化合物的增溶或助溶作用,其极性与溶剂极性相羌较大的化合物也可溶解出来。溶剂提取法一般包括浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法等,其实用反胃和特点各有所不同。连续回流提取法具有提取效率高、溶剂用量少等优点。本实验利用连续冋流提取法提取口芷中的香豆素。三、 试剂与仪器试剂:乙醇,白芷粗粉,石油瞇,乙瞇,蒸馆水,内酮。仪器:烧杯,圆底烧瓶,三角烧瓶,索氏捉取器,电子天平,恒温水浴,硅胶薄层板,色谱缸,球形冷凝管,真空泵。四、 实验步骤与记录(1) .口芷中香豆素的提取取口芷粗粉30g,置于索氏提取器中,加入95%的乙醇300ml,80°C恒温水浴凹流2h,捉取液减压浓缩至糖浆状。用丙酮溶解并转移至50ml三角烧瓶中,放置结晶,抽滤后,再重结晶,所得产品干燥称重,计算得率。(2) .产品的薄层色谱鉴定色谱材料:硅胶薄层板点样:产品,欧前胡素和异欧而胡素标准品。展开剂:右油醯■乙醸1:1显色:置紫外光灯(365nm)F,观察斑点颜色。展开方式:预饱和后,上行展开。五、 ,真空抽提后得到深棕色的糖浆状浓稠液体。丙酮转移静置后析出淡黄色晶体,精制后得到白色晶体。香豆素样晶中含有欧前胡素和异欧前胡素两种物质,并且还含有其他两种未知物质,。六、 注意事项抽滤操作要小心,以免倒吸。七、 问题讨论1) 连续回流提取法的原理是什么?有何特点?答:原理:将装好药材粉末的滤纸袋屮药粉高度应低于虹吸管顶部,自冷凝管家溶剂入烧瓶内