体外培养人晶状体上皮细胞整合素的表达和维拉帕米对其表达的抑制作用.pdf

广西医科大学硕士学位论文体外培养人晶状体上皮细胞整合素的表达及维拉帕米对其表达的抑制作用姓名:姚刚申请学位级别:硕士专业:眼科学指导教师:谭少健20070501体外培养人晶状体上皮细胞整合素的表达及维拉帕米对其表达的抑制作用硕士研究生学位论文英文缩写LECsHLECsPC0DM匣M/’AHEPESFITCRGDECMDMSOFCM,F!o’SModifiedEagleMedium/NutrientMixtureF-etraaceticacidFluoresceinisothiocynateArg·-Gly··AspextracellularmatrixdimethylsulfoxideFlowcytometry/fluorescence—activatedcellsortingroundperminutecalciumchannelblockersverapamilcalmodu【lineproteinkinaseC中文名称晶状体上皮细胞人晶状体上皮细胞后囊膜混浊DMEM/,本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切责任。论文作者签名:勘以7~1日期:加7.}.沙保护知识产权说明本人完全了解广西医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在校攻读学位期间,博士后工作人员、人才小高地工作人员在校工作期间,论文工作的知识产权单位属广西医科大学。本人保证在校期间和离校后,发表或使用论文工作成果时署名第一作者单位均为广西医科大学。学校有权保留论文,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。论文作者签名:扫b)小1日期:抄7,:研究体外培养的人晶状体上皮细胞整合素的表达以及维拉帕米对其表达的影响。方法:对人晶状体上皮细胞株SRA0I/04进行培养并传代,取对数生长期细胞用于实验。①免疫荧光法:制作细胞飞片,分5个实验组(0c2、0,3、0,5、13.、132)及阴性对照组,经冲洗、固定、封闭、抗体孵育后在荧光显微镜下观察各整合素在晶状体上皮细胞的表达。②流式细胞仪检测整合素的阳性表达率:制备细胞悬液并调整细胞浓度,设空白对照组、同型抗体对照组及各整合素实验组,经间接免疫荧光标记法处理细胞后上流式细胞仪检测。③维拉帕米对晶状体上皮细胞整合素表达的影响:、、、48h,同②法处理细胞后上流式细胞仪检测各整合素的阳性表达率。结果:整合素0,2、0,3、鸭、Dl、132在晶状体上皮细胞株SRAOI/04均呈阳性表达,其中整合素Bl(%)与0,3(%)的表达率最高,其次为0,2(%)、0,5(%),最低为D2(%)。整合素a3与pl之间无统计学差异(X2检验,p=),其余两两间比较均有显著统计学差异(x2检验,p<)。维拉帕米对晶状体上皮细胞株SRAOI/04整合素的表达具有抑制作用,并随药物浓度及作用时间的增加而逐渐增强(X2检验,p<)。结论:整合素0,2、a3、a5、D1、p2在晶状体上皮细胞株SRAOI/04呈阳性表达,可能在白内障术后晶状体上皮细胞的粘附、移行、增殖过程中起促进作用,进而导致后发性自内障的发生。而钙通道阻滞剂维拉帕米对晶状体上皮细胞整合素的表达具有抑制作用,其可能阻碍整合素介导的细胞粘附、移行和增殖,有望成为防治后发性白内障的有效药物。关键词:整合素;人晶状体上皮细胞;表达;维拉帕米;抑制2体外培养人晶状体上皮细胞整合素的表达及维拉帕米对其表达的抑制作用硕士研究生学位论文TheexpressionofintegrinsinculturedhumanlensepithelialcellsinvitroandtheinhibitionofverapamilonitABSTRACTObjects:Tostudythee