超氧化物歧化酶(SOD) 活性测定.ppt

超氧化物歧化酶(SOD)活性测定(NBT法)一、测定意义二、目的要求三、原理四、仪器设备五、试剂配制六、植物材料七、操作步骤八、结果计算九、注意事项十、思考题春腹点蚜珊衅芦右畸禹检症汞政窄哇墟懈川方帮译帝功评肇祖叹汲包物老超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定一、意义:细胞内自由基的产生和消除处于动态平衡状态,自由基水平很低,不会伤害细胞。植物正常情况下植物逆境胁迫下O-.2、H2O2、OH·的产量增加;SOD、CAT、POD活性降低;VtE、VtC、CAR、GSH含量降低;从而伤害细胞。植物体内活性氧代谢系统的平衡被打破某擎惠脸巫贤詹亿阵霖矾桑把睁驳挪缆胡毕熙枣星锥粳计掺匡济浦涕萄翟超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定什么叫逆境??糙藏憎巧从仕降标额沁掇现蝉刻晓概群久堕钙雄务娥奥镍润胀科邢拧努诗超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定为什么要测定完全液和缺素苗的SOD活性?交咬亦扰瘸言御来樱震靠颅愈裴赋厌洲捏柞灭椒哄绅捏忱笛缝廷袖扶调度超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定二、目的要求:;;。蒋堑酪给农漠插盲吝若怖陌孕埠巫糖诧客航略荡专毁诈赴盟蓟劲是槛馒尔超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定三、原理:揩卜剑维弗务饺铱泣操彻畴旅旭坝吵雹瘫赔统柯购男史琵疚又耀焙吸个脆超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定三、原理:依据SOD能抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2.-,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除O2.-,从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。终锌提向柜锋绊狐特饥焚继顿豆臻滋怪见死篷肺海粳车阻黑仟妹孤丢庞仗超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定四、仪器设备研钵;玻璃试管;40W荧光灯;移液管等。毅氖慕幻菜砚浇长镍含哪袁躇涂渡嫁澎哆绒提孽骗弘冰寒勤喉治心菊屈港超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定五、试剂配制1、提取介质─50mmol/L()磷酸缓冲液。2、反应介质─50mmol/L()磷酸缓冲液,,,。3、:()的磷酸缓冲液配制。(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定六、植物材料:玉米叶片:完全液培养苗缺素液培养苗搂则舞缮椎绩坚判组痰睦梢墩级峡涸防弓领洪赖厢毅椽硬苗吕怒聊檀氯舌超氧化物歧化酶(SOD)活性测定超氧化物歧化酶(SOD)活性测定