实习二红细胞网织红细胞检测.ppt

实验诊断实习二红细胞、网织红细胞检测目的和要求?熟悉正常红细胞和网织红细胞的形态学特点?掌握血红蛋白测定方法、参考值和临床意义?掌握血细胞多参数报告单的正常值及其增减的临床意义红细胞计数(red blood cell count)?红细胞计数是取一定微量血液,经稀释后计算出血液内所含红细胞数目?原理:用等渗稀释液将全血稀释至一定倍数,充入血细胞计数池,在光学显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经换算求出每升血液中的红细胞数量?方法:显微镜计数法器材及试剂:?取血吸管,一次性定量采血管(20ul) ?计数板:是一块厚玻璃制成,板上刻度分为9 个大方格面积为Imm2。中央大方格用于红细胞计数,被双线等分成25 个中方格,每个中方格又划分为16 个小方格。计数板与盖玻片组成计数池, ?显微镜、盖玻片、刺血针、棉花等?小试管、刻度吸管、红细胞稀释液。?其它: 75% 酒精棉球及干棉球操作: ?取血:?选择耳垂边缘或指端,先用75%酒精棉球消毒局部皮肤。等待干后,用消毒后的刺血针刺入皮肤,深约2 毫米。待血液从针孔流出,用于棉花擦去第一滴血?轻轻挤压,使血液流出形成绿豆大小的血滴。操作者用右手平拿取血吸管尖端浸入血滴中,缓缓吸血恰至“10 ”刻度处为止。然后用干棉花擦净吸管外沾附的血液?稀释及混匀?先准备一清洁小试管, 毫升,备用?将取好的血液立即挤入上述试管中,并来回吸取小量稀释液数次,以便将残余在吸管中的血液全部洗净?摇动试管,充分混匀。此时血液被稀释200 倍?充池?先将计数板及盖玻片擦干净,并将盖玻片复盖于计数池上面。?用吸管吸取己充分混匀的稀释血液一滴,滴于盖玻片的下方边缘处,稀释血液即充填入计数池中。注意勿发生气泡或使稀释血液流入计数池旁小槽内?静置2 -3 分钟,待红细胞完全下沉稳定后进行计数?计数?平放计数板于显微镜台上,先用低倍镜找到计数池的中央大方格。观察红细胞是否均匀,并调整至视野中间。?再转换高倍镜计数。镜下红细胞为圆形或盘形、略带黄色的细胞。如将上侧线和左侧线上的红细胞都计数在内,则不要再将下侧和右侧线上的细胞计入。计数时必须按一定方向和顺序,以免将红细胞重复计数或漏数。?计数5 个中方格( 即四角的及中央的中方格) 由红细胞总共的个数,将其结果乘以10 。即得每立方毫米血液中所含红细胞数目,再乘以10 。即得每升血液中所含红细胞数目。?每升血液中红细胞数目= 五个中方格内红细胞个数×5( ) × 10 ( 变为1 u1) × 10 6 ( 变为1L) ×200( 稀释倍数)= 五个中方格内红细胞个数× 1010?清洁仪器:?计数后,将盖玻片及计数板用水冲洗干净,再用绸或细布擦干?吸管先用蒸馏水,继用95% 酒精,后用乙醚洗涤干净,保存备用注意事项?不能在有水肿、炎症、淤血等部位或刺血过浅处采血?所用吸管、试管、滴管及血细胞计数板须干净无水?操作迅速,充池一次完成,不能有气泡?红细胞分布不均,每个中方格之间相差大于20 个时要重新充池计数