中药红曲中桔霉素含量测定方法研究进展.doc

中药红曲中桔霉素含量测定方法研究进展中药红曲中桔霉素含量测定方法研究进展刘曦,郭树仁,何大林(北京北大维信生物科技有限公司,北京100080)[摘要】目的:::桔霉素的测定方法有高效液相色谱法,薄层扫描法,:酶联免疫法是目前检测桔霉素最为灵敏的方法,但测试费用昂贵,,在前处理方法上进行改进,可以弥补回收率低的缺点.[关键词】桔霉素;含量测定红曲是我载它"甘,温,,健脾燥胃".如今,它在降血脂中药,天然食品着色剂,,…证实了某些红曲菌株会产生对人畜有害的真菌毒素——桔霉素后,,德国等国家在进口红曲时,对桔霉素含量制订了严格的要求和限制,,—,,结晶呈柠檬黄针状结晶,熔点175℃,易溶于乙醇,甲醇,乙酸乙酯,:~g?mL~,],作用的靶器官主要为肾脏,它不仅可以致畸,致癌,,定量测定的方法,如薄层层析法(TLC),高效液相色谱(HPLC)结合荧光检测法,高效液相色谱结合紫外检测法,酶联免疫法等,,关系到回收率高低,,,在预处理富集时,当外加标准桔霉素后,无论是采用水浴蒸发溶剂还是冻干法蒸发溶剂,桔霉素都会有一定的损失,,加热法在样品处理时由于加热导致了桔霉素的损失增大,多次转移也会造成损失;超声提取,制备TLC接HPLC测定的方法可使回收率达~100%,检测结果重现性好,该方法宜在桔霉素含量较低的情况下采用;甲醇一氯仿(1:1)磁力搅拌提取,40℃真空浓缩后直接进行HPLC测定的方法简单,结果准确,可靠,【?L磷酸,用一种名为Extrelut(Merck)的填料装柱,,~柱除去部分杂质并富集桔霉素,也是一种较好的前处理方法.[通讯作者】刘曦,Tel:(010)82627886,E—mail:******@/$'INOlM在提取溶剂的选择上,经比较用甲醇或氯仿的单一溶剂和用甲苯,乙酸乙酯,甲酸,甲醇组成的复合溶剂从色素含量较高的红曲中萃取桔霉素后发现],在单一溶剂中,只有甲醇萃取桔霉素的效果较好,(3:7:1)在萃取较少色素的同时,可萃取出最多的桔霉素,,提取物用硅藻土吸收,加入重碳酸钠溶液,干燥后用流动相甲醇一水(4:1)溶解,以反相HPLC分析,在桔霉素含量为200—1600ng?%%,%~%.,用于分离测定红曲中桔霉素含量时,以瑞典产的KromasilC,,分离效果好等方面综合考虑,比较了不同流动相后认为2%冰醋酸水溶液一甲醇(70:30),×10一mol?L的氢氧化四丁基铵(TBA)的甲醇溶液,用1mol-,?min~,柱温箱21℃.洗脱液进检测器之前先以lmol?L盐酸为柱后衍生化试剂,?min'.,,发射波长500nm,色谱柱为C