河南科技大学
硕士学位论文
基于菌丝体的羊肚菌鉴定及分子系统学研究
姓名:张华
申请学位级别:硕士
专业:植物病理学
指导教师:林晓民;侯军
20091201
摘要
论文题目: 基于菌丝体的羊肚菌鉴定及分子系统学研究
专业: 植物病理学
研究生: 张华
指导教师: 林晓民侯军
摘要
羊肚菌是一类具有重要食用和药用价值的珍稀经济真菌。虽然近些年对羊肚
菌形态学、生物学特性和系统分类学等方面的研究取得了一定成果,但目前依然
存在诸多问题:(1)基于菌丝体的羊肚菌鉴定没有统一的标准;(2)对羊肚菌
种属的划分依然存在分歧。
本研究对 18 个菌株进行基于菌丝体的羊肚菌鉴定和分子系统学研究。采用
分子方法对所获菌株进行鉴定。通过克隆测序,确定 18 个菌株的 ITS 序列,在
Genebank 数据库中检索比较后,可以准确的鉴定出羊肚菌各菌种,并确定
50536、50537、50647、50648、G5241 五个菌株并非羊肚菌。
通过菌丝体形态比较观察发现,羊肚菌的菌丝体可以分为表面菌丝和基内菌
丝。表面菌丝有明显主干、挺直、有光泽,初期呈白色或淡黄色,辐射生长、后
逐渐变为黄色至黄褐色,菌丝主干多分枝,分枝可分为两类,一类形成次级主
干,形态与一级主干类似;另一类伸入培养基内形成基内菌丝。基内菌丝短粗,
无主干,颜色相对较浅。通过此特征可将羊肚菌与其它真菌菌株区分开来,为通
过在菌丝体形态区分羊肚菌提供了依据。
对已确定菌种的 13 个羊肚菌序列进行同源性比对,采用最大简约法
(Maximum Parsi- mony Method,MP)和邻接法(Neighbor-Joining Method,
NJ )构建分子系统树,探讨羊肚菌的种类划分和系统发育关系。结果表明,通
过 ITS 序列分析可以将羊肚菌分为两大类群,一类的 ITS 序列较长(1098-
1172)包括菌种 和 ;另一类的 ITS 序列较短(698-702)
包括菌种 和 。这个研究结果支持将羊肚菌划分为黄羊肚菌和
黑羊肚菌两大类群,且黄羊肚菌的 ITS 序列较长。上述分支结果与形态特征也是
吻合的。
关键词:羊肚菌,ITS 序列,菌丝体,系统发育树
论文类型:应用基础研究
I
摘要
Subject: Strains Identification Base on Mycelium and Molecular
Systematic Studies
Specialty: Phytopathology
Name: Hua Zhang
Supervisor: Xiaomin Lin Jun Hou
ABSTRACT
Morchella sp. is a kind of economic fungi that have important edible and
medicinal value. Although recently studied on the aspects of morphology, biology,
taxonomy and molecular biology have some results, but there remain many problems:
(1) There is no uniform standard of identification based on the mycelium ; (2) It still
have differences about division of the species.
In this study, identify the 18 strains whether Morchella sp. based on mycelium
character of morphology and molecular. Sequence ITS sequences of 18 strains and
identify the various strains of Morchella sp. searching Genebank database. Finaly
confirmed 50536, 50537, 50647, 50648, G5241 are not Morchella sp..
parison by mycelium observed, the mycelia of Morchella sp.
can be divided in
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