2021年小鼠相关转录因子试剂盒新版说明书.docx

小鼠Runt相关转录因子2 (RUNX2)酶联免疫吸附测定试剂盒
使用说明书
产品编号：E-EL-M1030
（本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊疗!）
申明：尊敬用户，感谢您选择本企业产品。本产品选择世界著名生产厂家原料，采取专业ELISA kit生产技术制造。适适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组RUNX2浓度。使用前请仔细阅读说明书并检验试剂组分！如有疑问，请立即联络伊莱瑞特生物科技。
试剂盒组成：
名称-汉字
名称-英文
规格
保留条件
ELISA酶标板
Micro ELISA Plate
8×12 / 8×6*
4℃
冻干标准品
Reference Standard
2/ 1支*
4℃
标准品&样品稀释液
Reference Standard & Sample Diluent
1瓶 20mL/12mL*
4℃
浓缩生物素化抗体
Concentrated Biotinylated Detection Ab
1支 120μL/70μL*
4℃
生物素化抗体稀释液
Diluent for Biotinylated Detection Ab
1瓶 10mL/6mL*
4℃
浓缩HRP酶结合物
Concentrated HRP Conjugate
1支 120μL/70μL*
4℃(避光)
酶结合物稀释液
Diluent for HRP Conjugate
1瓶 10mL/6mL*
4℃
浓缩洗涤液（25×）
Concentrated Wash Buffer （25×）
1瓶 30mL/16mL*
4℃
底物溶液（TMB）
Substrate Reagent
1瓶 10mL/6mL*
4℃(避光)
反应终止液
Stop Solution
1瓶 10mL/6mL*
4℃
封板覆膜
Plate Sealer
5/3张*
产品说明书
Product Description
1份
*: [96T/48T]（打开包装后请立即检验全部物品是否齐全完整）
检测原理:
本试剂盒采取双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠RUNX2抗体包被于酶标板上，试验时标本或标准品中RUNX2会和包被抗体结合，游离成份被洗去。依次加入生物素化抗小鼠RUNX2抗体和辣根过氧化物酶标识亲和素。抗小鼠RUNX2抗体和结合在包被抗体上小鼠RUNX2结合、生物素和亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离成份被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶催化下现蓝色，加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波优点测OD值，RUNX2浓度和OD450值之间呈正比，经过绘制标准曲线求出标本中RUNX2浓度。
标本搜集:
血清：全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，搜集血液试管应为一次性无热原，无内毒素试管。
血浆：，标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂标本。
组织匀浆：用预冷PBS (, pH=)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎组织和对应体积PBS（通常按1:9重量体积比，比如1g组织样本对应9mLPBS，具体体积可依据试验需要合适调整，并做好统计。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充足研磨。为了深入裂解组织细胞，能够对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最终将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。
细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
其它生物标本：1000×g离心20分钟，取上清即可检测
（具体处理方法可参考：）
标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。
标本搜集后若不立即检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃/-80℃冰箱内，避免反复冻融，1-6月内检测,4℃保留应在1周内进行检测。
假如您样本中检测物浓度高于标准品最高值，请依据实际情况，做合适倍数稀释(提议先做预试验，以确定稀释倍数)。
试验所需自备物品:
酶标仪(450nm波长滤光片)
高精度移液器，EP管及一次性吸头：-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
吸水纸
检测前准备工作:
请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。