沈阳农业大学
硕士学位论文
番茄叶霉病菌拮抗细菌筛选及发酵条件研究
姓名:李艳丽
申请学位级别:硕士
专业:农药学
指导教师:纪明山
20060510
嘻恸和奶研究生签名:乃括厕时间:常辏拢缤时阃;┦阦日独创性声明关于论文知识产权和使用授权的说明时间:唬昙樱C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得沈阳农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本论文的知识产权为沈阳农业大学所有。本人完全了解沈阳农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意沈阳农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的内容。学位论文中的所有内容不经沈阳农业大学授权不得以任何方式擅自对外发表。研究生签名:导师签名导师签名:
摘要番茄叶霉病是番茄生产上一种重要病害,目前生产上,化学防治对其有一定预防和防治作用,但随之带来了严重的环境污染等问题。作者对从辽宁、山西、黑龙江、吉林、内蒙古等省及自治区不同的番茄栽培地区采集健康成熟的番茄叶片上,经分离纯化,筛选出株对番茄叶霉病菌有不同程度抑制作用生防菌株,其中拮抗细菌对番茄叶霉病菌具有强烈抑制作用。经培养形状、菌体形念观察和生理生化测定,鉴定菌株为芽孢杆菌。研究表明:菌株的菌体为杆状,具圆端,革兰氏染色阳性,常以成对或不同程度的链状排列。细胞大小为..一豰,以周生鞭毛运动。大部分细胞都产生芽孢,芽孢多数中生,呈椭圆形,孢囊不膨大。在平板上,菌落圆形,乳白色,有皱折,膜质,不透明。对葡萄糖产酸不产气,接触酶试验、淀粉水解试验、匝椤⒚鹘核馐匝均呈阳性。发酵条件研究表明,培养基种类、、培养温度、培养时间对该菌株产生拮抗物质有不同程度影响。在液体培养基中含淀粉鞍纂,琾,抑菌活性最强,最有利于抗菌物质的产生:当温度为℃,为三角瓶中装禾迮嘌又至课痸保琀瓴目咕镏室志活性最高。培养液中抗菌物质活性随着培养初期时间的延长而增加,培养本逶长量最大,而后生长缓慢,在培养螅宀锏阶畲笾担笏孀排嘌薄喊貸的延长,菌体产生量逐渐减少,抑菌液活性也开始逐渐的减小。本文初步研究了菌株发酵产生的次生代谢产物的理化性质。菌株经过连续多次继代培养后,其抑菌作用仍较稳定:高温处理后仍具有菌活性,但活性有所减弱,表明这些物质中部分物质具有耐高温的特性,是几种活性物的混合物。通过生长速率法测定证明,。关键词:番茄叶霉病菌:拮抗细菌;初步鉴定:发酵条件洗懵┮等搜е学位论文
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刚水平的提高,我国蔬菜种植面积迅速增加,特别是保护地蔬菜生产的迅速发展。由于保泛利用有益微生物及其代谢产物业抑制病原菌的生存和活动,使这一防治策略发展迅已对保护地番茄的生产造成威胁。其中在约有蛉怂劳觥;┮┑墓惴河τ檬构谠郊碓降P钠浒踩院投曰肪吃斐蔬菜是人们同常生活中不可缺少的食用植物。近几年来,随着农业结构和人民生活护地特殊的生态环境条件适宜叶霉病的发生与发展,因而其危害日益严重。多年来由于杀菌剂的长期应用,使得病原菌对化学菌剂产生了严重的抗性,导致防病效果大大下降。同时大量使用化学农药也污染环境,使得蔬菜农药残留超标,危害人类健康。国内外广速,其中拮抗细菌在植物病害防治中起到非常重要的作用,无论是自然发,£的生物防治现象还是人们用于生物防治的生物类型中,细菌的作用是非常明显的。番茄叶霉病由褐枝孢菌恳穑镁粲诎胫>敲拧⑺孢纲、丝孢目、暗梗孢科、枝孢属。番茄叶霉病是番茄生产上的生要病害之一,俗称“黑毛病”.在全世界均有分布,在我国华北、东北发病较重,是典型流行性病害。该病始见于陆地栽培番茄上,但随着保护地面积的增大,加之保护地栽培条件有利于叶霉病的发生流行,叶霉病有逐年加重趋势,至今己成为保护地番茄生产上最严重的病害之一。番茄叶霉病主要危害叶片,初期在叶片正面出现淡黄色病斑,椭圆形或不规则形,边缘不明显,后期叶背面长出霉层。,发病严重时,病斑密集,叶片发黄,最后干枯早落。据调查统计,每年由番茄叶霉病引起的产量损失达%ィ番茄叶霉病作为保护地番茄的重要病害,目前生产上防治方法主要有以下几种:抗病育种、加强栽培管理、合理轮作倒茬、严格种子消毒、土壤消毒处理、密闭熏
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