11、培养基灭菌及灭菌设备
1、灭菌的方法
2、培养基的灭菌
3、培养基的分批灭菌
4、培养基的连续灭菌
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1,在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果:
生产菌和杂菌同时生长,生产菌丧失生产能力;
在连续发酵过程中,杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快,结果使发酵罐中以杂菌为主;
杂菌及其产生的物质,使提取精制发生困难
杂菌会降解目的产物;
杂菌会污染最终产品,杂菌会污染最终产品;
发酵时如污染噬菌体,可使生产菌发生溶菌现象。
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2,工业上具体措施包括:
1)使用的培养基和设备须经灭菌;
2)好氧培养中使用的空气应经除菌处理;
3)设备应严密,发酵罐维持正压环境;
4)培养过程中加入的物料应经过灭菌;
5)使用无污染的纯粹种子。
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3,培养基灭菌的目的
杀灭培养基中的微生物,为后续发酵过程创造无菌的条件。
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4,培养基灭菌的要求
达到要求的无菌程度(10-3)
尽量减少营养成分的破坏,在灭菌过程中,培养基组分的破坏,是由两个基本类型的反应引起的:
培养基中不同营养成分间的相互作用;
对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。
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二、培养基的灭菌一、灭菌的方法
灭菌:用理化方法杀死或除去物料或设备中一切有生命物质的过程。常用的有:
1、化学药剂灭菌
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常用的灭菌剂
化学物质名称
有效浓度
化学物质名称
有效浓度
新洁尔灭(苯扎溴铵)
%
甲醛
37%
杜灭芬
%
戊二醛
2%
高锰酸钾
%-%
苯酚
%-%
漂白粉
5%
过氧乙酸
%-%
酒精
75%
焦碳酸二乙酯
%-%
煤酚皂(来苏尔)
1%—5%
*
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2、射线灭菌
原理:利用高能量的电磁辐射与菌体核酸的光化学反应造成菌体死亡。
常用:紫外线、X射线和γ射线。
使用范围:用于室内空气及器皿表面灭菌
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3.干热灭菌
原理:利用高温对微生物有氧化、蛋白质变性和电解质浓缩作用而杀灭微生物。
常用方法:灼烧和电热箱加热,140-180℃ 1-2小时
使用范围:玻璃及金属用具及沙土管灭菌
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4.湿热灭菌
原理:蒸汽冷凝放出大量潜热,具有穿透力,且在高温有水分条件下,蛋白质易变性。
常用方法:
水煮常压灭菌:100℃
饱和蒸汽灭菌:一般121℃,15-20分钟
使用范围:培养基和发酵设备灭菌。
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