喹噁啉类定量分析方法及脱氧速率的研究.pdf

华中农业大学
博士学位论文
喹噁啉类定量分析方法及脱氧速率研究
姓名:吴玉杰
申请学位级别:博士
专业:食品科学
指导教师:袁宗辉
20070801
喹嗯啉类定量分析方法及脱氧速率研究摘要研究生:吴玉杰导师:袁宗辉教授喹唾啉类是化学合成的具有抗菌、促生长作用的动物专用药,被广泛用作猪、鸡、鱼等动物的饲料添加剂,主要包括卡巴氧、喹乙醇、喹赛多、喹烯酮和乙酰甲喹等忠┪铩R蚨靖弊饔茫ò脱鹾袜掖家驯唤够蛳拗剖褂谩V泄嗉膛了乙酰甲喹和喹烯酮的使用,并正在开发较安全的喹赛多等同类替代产品。但喹嗯啉类的滥用和非法使用现象普遍,药物毒性及残留造成的潜在的食品安全危害不容忽视,开展这类药物毒性作用机制及其在饲料和动物源食品中的分析方法研究具有重大意义。喹嗯啉类分析方法研究禁锢于单一基质、单组分,不同基质中多种喹曝啉类分析方法研究未见报道。喹嗯啉类毒性研究也仅局限于推测其源于脱氧过程,但未见毒性与脱氧速率关系的阐述。本课题从喹嗯啉类分析方法展开研究,深入探索并建立饲料中喹嗯啉类和动物可食性组织中喹嗯啉类残留标示物的同时分析方法,进而初步探讨喹嗯啉类脱氧速率和毒性的关系,具体为以下鲅芯刻逑的谌荨这些研究为这类药物的残留监控和毒性作用机制等研究提供技术支持和理论依据,对动物源食品安全评价具有指导意义和参考价值。橇现朽胚嘁┪锿狈治龇椒ㄑ芯喹嗯啉类高效液相色谱同时分析方法。,中性氧化铝固相萃取小柱净化,高效液相色谱梯度洗脱分离,紫外波长测定。不同饲料样品中,忠┪,其它忠┪锏幕减少有机试剂用量,消除饲料基质对喹嗯啉类药物测定干扰。仪器测定条件选择过国家兽药残留基准实验室/农业部食品安全评价重点开放实验室,华中农业大学,武汉,中国深入探索样品前处理和检测方法,确定最佳条件,建立猪、鸡、鱼饲料中/,∮発在、⑷占湎喽员曜计ú,可以节省样品前处理时间,避免有毒试剂的使用,程中,采用流动相梯度洗脱方式,考察了流动相成分和比例对粥胚嘁┪锿喹嚯啉类定量分析方法及脱氧速率研究
/,.;ぜ谆痩魑W贤饧觳馄鞑舛úǔぃ徊蕉种喹嗯啉类药物本方法操作简便、材料易得、环境污染小,可以广泛应用于猪、鸡、鱼等饲料中多种喹嗯啉类的监测,对饲料中其它化合物的多组分分析方法研究具有参考价值。锟墒承宰橹朽肋喽嗖辛舴治龇椒ㄑ芯探讨样品提取、净化和测定溶剂等条件,建立猪、鸡、鱼肌肉及猪、,乙酸乙酯提取,趵胱庸滔噍腿⌒≈换碱性甲醇溶解浓缩残渣,高效液相色谱分离,贤獠ǔげ舛āV怼⒓Α⒂慵肉组织中喹嗯啉一人岬腃为~啉人岬腃为~—“痥一甲基喹噫啉一羧酸的动物肌肉组织中添加浓度为/,回收率为.%,相对标准偏差ィ涸谥怼⒓Ω卧嘧橹砑优ǘ任标准偏差ァ酸性环境水解样品,结合阴离子固相萃取小柱净化,简化了样品前处理步骤,避免强酸、强碱和有毒试剂的使用,可有效消除基质对药物测定的干扰,扩大了分析样品范围,方法灵敏度高。对比不同样品溶剂对两种分析物紫外吸收的影响,明吸光度变化值,减小了回收率测定误差,提高了分析方法的准确度。本方法样品前处理简单、基质干扰少、分析范围广、检测灵敏度高,基本达到胚嗤蜒跛俾恃芯建立脱二氧喹赛多、脱二氧喹烯酮和脱二氧喹乙醇的高效液相色谱测定方法,为喹嗯啉类脱氧产物定性分析提供技术方法。只衔锞咝б合嗌琢鞫嗵度洗脱分离,二极管阵列检测器测定,检测限为时分析的影响,选用进行筛选,对比不同溶剂对药物测定分析结果差异,确定粥肋嘁┪锿狈离分析的高效液相色谱条件。/,./。猪、鸡肝脏组织中喹嗯啉为./,./。喹嗯啉一羧酸和患谆胚霍人嵩诟/,回收率为..ィ喽确其经样品前处理后紫外吸收波长的变化,选用碱性甲醇溶剂,抵消了分析物紫外,可广泛应用于喹嗯啉类药物的残留监测,对动物组织中多残留分析方法研究具有指导意义,为动物性食品安全评价提供技术支持。//.
一级化学动力学规律,半衰期为氧速率最大,喹烯酮次之。化学还原体系中粥胚蜒跛俾使叵担亨卡巴猪肝微粒体中粥胚嗤蜒跛俾时冉希橹む胚嗤蜒跛俾使叵怠种药物在加有还原型辅酶的猪肝微粒体中孵育,高效液相色谱测定不同时间原形药物浓度,发现其脱氧还原反应符合一级化学动力学规律,忠┪锏陌胨テ谖脱氧速率为:喹赛多┩喹乙醇ò脱乙酰甲喹,速率越大毒性越低,脱氧论可为喹噫啉类毒性作用机制研究提供理论依据。本课题开展喹嗯啉类分析方法和脱氧速率的研究,在国内外首次建立了饲料中多种喹嗯啉类同时分析方法和不同动物可食性组织中喹嗯啉类多残留分析方法,比较喹嗯啉类脱氧速率快