脓毒症早期大鼠线粒体及多脏器功能损伤的研究.pdf

南方医科大学
博士学位论文
脓毒症早期大鼠线粒体及多脏器功能损伤的研究
姓名:曾其毅
申请学位级别:博士
专业:儿科学
指导教师:钱新华
20090410
脓毒症早期大鼠线粒体及多脏器功能损伤研究博士研究生:曾其毅指导教师:钱新华摘要【研究背景和目的】:质代谢和能量转化的中心,三羧酸循环、呼吸链电子传递及氧化磷酸化均在此的发生能够降低脓毒症的死亡率。肝脏等组织脏器,对早期脓毒症过程中线粒体的损伤及其机制及进行相关研究,并初步探索其早期干预方法。芯糠椒ā浚采用腹腔注射姆椒ń致脓毒症模型。大鼠根据检测时点博士学位论文脓毒症是危重症的主要原因之一,发病机制十分复杂,尚无特效的方法。病情迁延可引起多器官功能障碍综合征臀⒀泛拖吡L寰狡茸酆险,踔了劳觥O吡L迨窍赴疃闹饕9┠艹∷腔逦进行。它除了产生└赴枘芰客猓韵赴趸乖刺蜕秆沟节、钙稳态、维持及细胞凋亡信号传导起重要作用。线粒体结构和功能对细胞、组织乃至整个机体功能起着关键性作用,其损伤和衰竭与脏器功能损伤及脓毒症的预后密切相关。脓毒症早期即可发生线粒体损伤,损伤机制尚不明确。近年研究证实,是脓毒症的主要死亡原因之一,早期诊断、干预可防止本研究制作麓笫笈Ф局⒌哪P停姓攵孕缘匮∪∩鲈唷⑸錾舷佟⒛浴动物模型:,
随机分组,槊恐淮笫蟾骨蛔⑸銵/,对照组不进行腹腔注射。经检测,实验组大鼠出现不同程度的心率、呼吸、体温、白细胞增高等全身炎症反应,内毒素血症,以及冲增高。本研究的设计分为三步:第一步,脓毒症早期线粒体损伤及与脏器功能关系的研究。肾脏是经典的在脓毒症早期即出现组织结构和功能损伤的脏器,其损伤的加剧更可直接或间础的离子通道,因此肾脏线粒体损伤将直接影响到肾脏功能。肾上腺是机体在占全身能耗的%ィ欢吡L遄魑Q趸姿峄闹饕3∷悄阅芰康第三步,脓毒症早期线粒体保护的尝试。肝脏是机体进行物质和能量代谢的重要器官,线粒体含量极为丰富。肝脏线粒体功能的正常运行,是机体新陈中文摘要接影响到其他脏器的功能,进而导致。肾脏内存在多种以D芰炕早期发生应激反应、调节机体内分泌的器官,其功能损伤直接关系到脓毒症的的发展进程;且肾上腺作为在脓毒症中的对机体起保护作用的器官,与容易受损的肾脏相比,推测二者抗损伤能力可能存在一定差异。进行脓毒症早期大鼠线粒体超微结构观察和评分、线粒体致密度及膜电位等检测,以判断肾脏和肾上腺线粒体损伤程度,通过血清尿素氮、肌酐及皮质醇分别检测肾脏和肾上腺功能的损伤,通过相关分析探讨线粒体损伤与肾脏和肾上腺功能损伤之间的关系。通过线粒体内氧化应激因子的检测比较肾脏和肾上腺线粒体损伤机制的异同。第二步,脓毒症早期线粒体损伤机制的探讨。脓毒症脑功能损伤的发生一般出现在脓毒症的∈弊笥摇D允腔宓母呒渡窬惺啵淠芰肯木薮螅最主要来源,其功能对于维持正常的脑功能至关重要。因此,选择脑组织研究脓毒症超早期线粒体损伤的情况,检测血清、脑组织中炎症因子,以及脑线粒体氧化应激因子,通过分析线粒体损伤、炎症因子、氧化应激因子三者之间的相关性,探讨线粒体损伤的发病机制,为寻找早期阻止线粒体损伤的方法提供线索和理论依据。Ⅱ
代谢正常进行的保障。胰岛素是机体进行物质和能量代谢调节的重要激素,可脏线粒体的保护作用并探讨其机制,尝试探索早期阻断脓毒症线粒体损伤的途机制。氧化应激因子包括趸锲缁ü橹瓯敬筇骞鄄旌蜕副昙觳飧髟嗥鹘峁购凸δ芩鹕恕R匝G尿素氮、肌酐水平反映肾脏功能;以血清皮质醇浓度反映肾上腺功能;以血清⑴Ф局⒃缙凇鲈嗪蜕錾舷傧吡L逅鹕思坝朐嗥鞴δ芄叵档难芯俊Q∪∨毒症早期大鼠的肾脏和肾上腺为研究对象,分别代表机体内易受损和对机体起保护作用的两类不同的脏器。只大鼠随机分为对照组、腹腔注射和椋冉掀湓嗥鞴δ芎拖吡L逅鹕饲榭觯⒊醪教教制渌鹕嘶频囊焱⑴Ф局⒃缙谀韵吡L逅鹕嘶频奶教帧籗笫笏婊治6哉兆椤、和椋芯颗Ф局⒊缙谀宰橹吡L逅鹕说那榭觯博士学位论文通过各种机制减轻脓毒症早期炎症反应及高代谢、高动力循环状态。因此,我们以持续胰岛素输注脓毒症大鼠,与脓毒症大鼠比较肝脏功能和线粒体的损伤程度、血糖和炎症反应的控制程度,观察脓毒症早期胰岛素治疗对脓毒症时肝径。本研究主要选取以下检测指标:ü吡L逍翁Ч鄄旌凸δ芗觳庋芯肯吡L逅鹕俗刺R缘缇倒鄄煜粒体形态学变化,吡L灏攵科婪郑魇较赴羌觳庀吡L逯旅芏取测定线粒体膜电位和线粒体酶活性反映线粒体功能。ü吡L迥谘趸ひ蜃右约盎逖字⒁、丙二醛,浓度、还原性谷胱苷肽珿钚浴⒁谎趸琋浓度以及一氧化氮合酶,活性。..。转氨酶水平反映肝脏功能。分组:腹腔注射
并探讨线粒体损伤的发病机制。⑴Ф局⒃缙诟卧嘞吡L灞;さ某⑹浴籗笫笏婊治U6哉铡楹鸵鹊核馗稍ぷ椤T诖笫蟾骨蛔⑸銵后鄄煸缙谝鹊核刂瘟贫耘⑴Ф局⒃缙诖笫蟆I鲈