癌胚抗原(CEA)测定(化学发光法测定).doc

西安长安医院检验科癌胚抗原( CEA )测定( 化学发光法测定) 文件编号: CA-JY-CZ-MY 第二版执行日期: 2010-1-4 共5页第1页 1原理癌胚抗原是一种糖蛋白,由胎儿胃肠道上皮组织、胰和肝的细胞所合成,属于非器官特异型肿瘤相关抗原物。适用于结肠癌、肺癌、胃癌的辅助诊断。本检验科使用日本东曹 AIA-1800 型全自动免疫分析仪进行测定,采用微粒子捕捉酶免疫分析技术(MEIA) 。 CEA 测定利用双抗体夹心法原理:已包被了抗体的塑料微珠试剂中,加入待测标本后,经温育,再加入碱性磷酸酶标记的抗体、形成“抗体- 抗原-酶标记抗体复合物”。然后将其转移到玻璃纤维柱上,用缓冲液洗涤,没有结合的抗原、酶标抗体被洗掉,结合抗原抗体的塑料微珠则被保留在纤维柱滤膜的上方。这时再加入底物: 4- 甲基伞型酣磷酸盐(4-Mup) 。酶标抗体上的碱性磷酸酶将 4-Mup 分解, 脱磷酸后形成甲基伞型酣(4-Mu) ,它在 365nm 激发光的照射下,发出 448nm 的荧光,经过荧光读数仪的记录、放大,计算出所测物质的含量。 2 标本采集与处理 原始样本类型: 血清、血浆或全血(应用抗凝剂为肝素钠、枸橼酸钠、 ACD 、 CPDA-1 或 EDTA )、尿液(晨尿、随即尿、 24小时尿等)或其他体液(羊水等)。 样本量: 根据不同项目样本量不等( 83μ l-238 μ l)。 患者准备: 严禁使用接受过鼠单克隆抗体诊断或治疗的病人样本,引起体内含有人抗鼠抗体( HAMA ) ,当这些样品在使用含鼠单克隆抗体分析试剂进行测试时,引起结果升高或降低。 样本采集方法:一般采用静脉采血。样本采集要求: 避免过度溶血,必须在无菌体条件下采集; 确保离心速度(10000 转/分钟)和时间(10分钟),避免颗粒物质的干扰。避免样品的反复冻融,溶解后的样品需低速震荡或轻轻颠倒混匀已获得稳定的结果。若样品中有颗粒物质,红血球或浑浊物质必须离心使其澄清后再进行测试。 样品的稳定期和保存:上机 3 小时内完成检测;2℃-8℃标本可保存 1-14 天; 若需长期保存(1年内),必须将血清分离出来,冷冻保存( -10 ℃或更冷)。 3试剂 所有试剂均购自东曹公司 TOSOH Ⅱ相关校准品 TOSOH Ⅱ相关校准品 1 TOSOH Ⅱ相关校准品 2 TOSOH Ⅱ样本稀释液 TOSOH Ⅱ基质: 4-甲基伞形酮酰磷酸 TOSOH Ⅱ基质溶解液 TOSOH Ⅱ清洗液 TOSOH Ⅱ缓冲液 试剂准备与检查: 从冰箱中取出 1号液(底物液)放入仪器从冰箱中取出相关测试试剂放入仪器检查所有试剂和缓冲液是否在有效期内,超过有效期的试剂不可使用检查所有试剂和缓冲液是否足够检查所有消耗品(纤维杯或反应杯)是否足够,废液或废物是否清空 试剂保存条件: 试剂盒、标准品、质控品在 2℃-8℃保存。其他试剂室温保存。 试剂性能可接受性: 按测定项目资料手册中质量控制章节所规定内容进行质量控制,结果必须在实验室规定的可接受范围内。 4 操作步骤 1开机前检查 a察看电源是否正常安全通电 b 推主机下部的前门,打开后检查洗净水与分注液的用量是否满足当日用量废试样杯与废吸嘴是否丢弃 2开机 a更换 75% 酒精,放置基质液 b打开电脑