lovastatin和功能性红曲对D6细胞增殖抑制及诱导凋亡研究.pdf

致谢
本文是在导师朱睦元教授的悉心指导下完成的,衷心感谢朱老师三年来在学
习、研究和生活中对我教导、关怀和培养。朱老师在学术上求是的态度,工作上
忘我的精神始终是我学习的榜样和前进的动力。
在实验及论文的完成过程中也得到了免疫实验室马志章教授的帮助和热情
支持得到了本实验室徐阿炳教授及其他老师的热心帮助浙二医院郁琳琳医师、
本校生仪实验室的王彦博士为实验的顺利完成提供了许多便利本实验室迟万
好、唐娟娟、陈虹、施永泰等同学,生理实验室姜蕾同学、细胞实验室邱丽燕同
学和韩国朴宰日博士的帮助。在此一并表示真诚的感谢。
最后,我要感谢我的父母亲一直以来在学业上对我的支持。
陈建瀚
摘要
洛伐他汀作为经基一一甲基戊二酞辅酶还原
酶的抑制剂一般用于治疗高胆固醇血症。随年来己有研究发现,能
够有效抑制多种肿瘤细胞株增殖并诱导细胞凋亡,关于在肿瘤抑制
机理及其肿瘤治疗效应研究己经受到极大关注扩沙训
本研究以人肺癌细胞株为实验材料,研究了对其生长的影响,
以及胆固醇在对细胞生长的调控中所起的作用。同时,以含
的功能性红曲为实验材料,分析在动物体内实验中的抗
肿瘤效应,探索功能性红曲是否具有抑制肿瘤的功能。
。债究结果显示,·能有效抑制人肺癌细胞株的增殖,并诱导其
凋亡。对的抑制作用是剂量依赖性的,其半抑制浓度约为
处理,即可将细胞停滞在至小时,细胞的凋亡
才比较显著。外源性胆固醇能部分逆转作用的细胞增殖抑制及细胞
凋亡,表明胆固醇参与了对细胞生长的调控过程。在荷小鼠的
体内实验中,观察到天后,饲以含红曲饲料的荷瘤小鼠其瘤重有下降趋
势。与对照组相比,红曲组的抑瘤率为红曲组的抑瘤率达
但未达到统计显著的差异性。最后讨论了的抑制细胞增殖和诱导细
胞凋亡的作用机理。
关键词红曲还原酸胆固醇
。朴凋亡‘小鼠严恻
、田乙
“




咖
第一部分文献综述
他汀类药物对细胞增殖及凋亡的影响
他汀类药物是轻甲基戊二酞辅酶还原酶抑制剂药物的总称,
因其药名均以一结尾被统称为他汀类,最早由日本学者。于年代末在
桔霉素提取液中发现,命名为,即美伐他汀
。随后,洛伐他汀、氟伐他汀、辛伐他
汀、普伐他汀、阿伐他汀、西伐他汀
逐渐问世。这类药物主要是通过抑制肝脏胆固醇合成的限速酶轻基一一甲基戊
二酸单酞辅酶还原酶的活性,从而使肝内胆固醇的合成减少。
由于肝内胆固醇水平的下降可解除对低密度脂蛋白胆固醇受体基因的抑
制,使肝脏内受体合成增加,从而使血浆中大量的被肝脏摄取而清除
,。这类药物现已普遍用于治疗高胆固醇血症,同时他
汀类药物抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用也逐渐为人们所认知。
他汀类药物的化学构造
作为他汀类中第一个被批准应用的药物,是从土曲菌发酵物中分
离出来的,其化学名为氢一双轻基一一双甲基一一甲基一苯一丁
酞氧基一庚酸一内酷,与较早期的从橘青霉中提取出来的结构相
似图列出了几种他汀类药物的结构式。是以为原料
合成,在侧链上引入甲基。则以为原料,经细菌或真菌进
行微生物转化,在六氢禁环的上引入经基而成。是一个完全由人
工合成的药物,它是对氟苯叫噪环的甲轻戊酞内酷衍生物,对氟苯叫噪部分模拟
辅酶作用于,侧链模拟甲轻戊酸丁小云等,
图几种它汀类药物的化学结构
他汀类药物的药理机制
甲轻戊酸是胆固醇合成过程中的一个中间产物
代谢通路图中的多种产物对于细胞的生物功能非常关键,包括膜的完整
性、信号传递、某些蛋白质合成以及细胞周期进展等。其中是该途径中至
关重要的成分。甲轻戊酸终产物包括固醇类化合物,尤其是胆固醇,参与膜脂质
和类固醇的合成泛醒、血红素一。参与线粒体呼吸链电子传递多菇醇与糖蛋
白合成有关异戊烯腺嗓吟修饰某些非幽醇类异戊二烯,如法尼基焦磷
酸和垅牛儿咙牛儿基焦磷酸参与某些蛋白质如核纤层蛋
白、异源三聚体蛋白和超家族的低分子蛋白的异戊二烯化,是这些
蛋白质翻译后成熟所必需的

乙酞辅酶十乙酞乙酞辅酶

合成酶


还原酶,
甲轻戊酸
甲径戊酸焦磷酸
一一卜
异戊二烯焦磷酸二甲丙烯焦磷酸
心,一,
咙牛儿焦磷酸异戊二烯腺吟
多蔽醇
蛋白质异戊二烯不柳一一一法尼焦磷酸
十泛酪
血红素
亨
盆瀚



,甲山类激素
胆捆
维生素
胆酸
月旨蛋白
图一甲胫戊酸代谢通路
还原酶是体内催化由乙酞辅酶合成甲轻戊酸这一代谢途径的
关键酶。他汀类药物结构的侧链部分与结构相似,其开放酸部分可与
还原酶活性部位相结合。各种他汀类药物与还原酶的亲和
力远大于与还原酶