会计学
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GS系统简介
GS系统是瑞士的LONZA公司开发出来的一种细胞基因表达系统。
LONZA(龙沙) 瑞士的制药化工巨头,龙沙集团是 一家以生命科学为主导,在生物化学、精细化工、功能化学等行业均处于领先地位的全球性跨国公司,具有一百多年历史,总部位于瑞士巴塞尔。
GS是glutamine synthetase (谷氨酰胺合成酶)的英文缩写,GS系统的全名是:Glutamine Synthetase Gene Expression System™,即谷氨酰胺合成酶基因表达系统。
GS系统是什么
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谷氨酰胺的酶促反应
谷氨酰胺合成酶是一种能将谷氨酸和氨合成为谷氨酰胺的酶。这种酶促反应是动物细胞获得谷氨酰胺的途径。
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GS系统的原理
在不含有谷氨酰胺的培养基中,谷氨酰胺酶在哺乳动物细胞的生长中扮演着非常重要的角色:
一些哺乳动物细胞系,如小鼠骨髓瘤细胞, 在没有添加谷氨酰胺的培养基中,无法表达足够的谷氨酰胺来维持生存。在这些细胞中,转染GS基因可以在无谷氨酰胺培养基中作为选择标记来获得增殖。
其他细胞系,如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,表达足够的GS离不开外生谷氨酰胺。在这些情况下,GS抑制剂,L-氨基亚砜蛋氨酸(Methionine Sulphoximine MSX),可用于抑制内源性GS活性,只有转染了额外GS基因可以生存。
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GS系统的原理
即:
用含单抗蛋白等的目的基因和GS基因标记的表达载体,转染宿主细胞(如CHO),再通过MSX等化合物选择加压,促使GS基因和目的蛋白基因扩增,筛选获得重组细胞株。可在不含有L-glu的培养基中生长。
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GS系统的优势
产量高
速度快
稳定性好
可比性高
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产量高
蛋白质产品的制造成本高,特别是对于治疗性蛋白质,意味着如果生产流程已经建立起来的话,体积最大化时的生产率至关重要。使用GS系统™可靠结果的高产细胞系细胞早期建设项目。最大表达水平的实现取决于产品,但产量超过5 g / L的重组抗体的细胞系已经创建,而某些特定的蛋白,其生产率在15 - 65 pg /细胞/天。
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产量高
Figure 1: Productivity in chemically defined, animal component-free v8 GS-CHO commercial platform process for Lonza’s model antibody .
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产量高
Figure 2: Productivity in chemically defined, animal component-free GS-NS0 bioreactor process
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速度快
在任何生物技术项目的开发阶段,速度对成功是至关重要的。在第一次筛选,GS系统™就能快速的选择出高产的细胞系。甚至通过培养基和流程的优化以获得更高的收益率。这会显著减少生成适合cGMP制造的一个细胞系所需的时间。利用能够在单一连接步骤中插入任何可变区域的GS恒定区域载体来建设人类恒定区域标准长度抗体将变得迅速而简便。
Lonza的专有CHOK1SV宿主细胞相比标准CHOK1流程能更好的适应无蛋白悬浮培养体系。
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