实验五 网织红细胞计数
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一、试管法
【目的】 掌握网织红细胞试管法的原理及操作方法。
【原理】 网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体和核糖核酸(RNA)等嗜碱性物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后呈蓝色网织状或点粒状，可与完全成熟的红细胞区别。
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【操作】
1．加染液
2．加血染色
3．制备涂片
4．观察
5．计数
6．计算
7．报告方式
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【注意事项】
1．染液质量直接影响网织红细胞计数的准确性。煌焦油蓝染液长期普遍应用，但溶解度低，易形成沉渣吸附于红细胞表面；新亚甲蓝对Ret染色力强且稳定，是WHO推荐使用的染液。试剂应定期配制，以免变质沉淀。瑞氏染液复染可使网织红细胞数值偏低。
2．染色时间不能过短，室温低时，可放置37℃ 温箱或适当延长染色时间。染液与血液的比例以1∶1为宜。
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3．因网织红细胞在体外仍继续成熟，其数量随着保存时间的延长而递减，所以标本采集后应及时处理；标本染色后也应及时测定，因染料吸附可人为增高网织红细胞计数值。
4．选择红细胞分布均匀、网织红细胞着色好的部位计数。由于网织红细胞体积较大，故应兼顾血片边缘和尾部。
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二、玻片法
【目的】 掌握网织红细胞玻片法的原理及操作方法。
【原理】 网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体和核糖核酸(RNA)等嗜碱性物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后呈蓝色网织状或点粒状，可与完全成熟的红细胞区别。
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【操作】
1．加染液
2．加血液
3．制备涂片
4．观察
5．计数
6．计算
7．报告方式
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【注意事项】 同试管法。
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