凝血酶对实验鼠脑细胞毒性损伤机制的研究论文.pdf

苏州大学
博士学位论文
凝血酶对实验鼠脑细胞毒性损伤机制的研究
姓名:方琪
申请学位级别:博士
专业:神经外科学
指导教师:包仕尧

/目凝血酶对实验鼠脑细胞毒性损伤机制的研究脑出血发生率、死亡率和致残率均较高,然而动物实验和临床研究均发现,中等量的旧聿⒉灰鹇谘沟拿飨陨撸虼耍以不同剂量的凝血酶注入大鼠尾状核,建立脑水肿模型,采用一系列指标观察不同时相脑水肿,脑细胞凋亡及受损情况,及使用凝血酶抑制剂如水蛭素及钙离子拮抗剂崮5仄是否能减致脑水肿及水蛭素,尼莫地平对凝血酶致脑水肿的干预作用的研究国外已有文献报导,但国内尚未见相关报导;凝血酶致神经细胞凋博士研究生方琪导师包仕尧教授摘要血肿周围脑组织水肿和继发性神经元损伤是影响患者预后的主要原因,也是研究的热点。其中脑出血后血肿释放出的凝血酶被认为是导致血肿周围脑细胞水肿、脑细胞凋亡及坏死的关键因素,其机理尚不清楚。的,轻凝血酶对脑细胞的毒性作用,是否存在治疗的有效时间。凝血酶亡的研究在国外刚开展,国内尚属空白;而凝血酶对神经细胞骨架蛋白的影响在国内外均未开展相关研究,是本实验研究的创新之摘要、
处,将对脑出血后脑水肿及继发性神经元损伤的治疗提供实验室理立体定位下将不同剂量的凝血酶及不同干预药物注入大鼠尾状核,观察其脑水肿、神经元损伤程度及药物干预效果。变化来反映凝血酶对神经元乇鹗鞘魍弧⒅嵬弧氏赴黄⑼ü齌法、电镜观察脑细胞凋亡情况以及凝血酶特异性抑制剂水蛭素、钙离子拮抗剂崮5仄对上述过程的干预作支。尼莫地平组在建立模型后即刻给予腹腔注射尼莫地平/体重。以后每天注射沃潦笛榻崾惨恢堋论依据。法⒂酶墒V胤ḿ捌胀ü饩染色鄄炷运浊榭觥⑼ü庖咦榛ü鄄煜赴羌艿鞍,珿的损伤以及这种损伤是否可逆。用。大鼠随机分为椋组:生理盐水组;椋篸量凝血酶组;椋捍蠹亮磕C椋组:小剂量凝血酶〖亮克嗡椋组:大剂量凝血酶蠹亮克素组;椋耗崮5仄阶椋幻孔槊渴毕结果⒔⒍锬P秃螅、、三个时相点,大剂量凝血酶组脑含水量与其余各组比崮5仄阶橛肫溆喔髯楸萈,,,凝血酶对实验鼠脑细胞毒性损伤机制的研究摘要
,钙离子拮抗剂尼莫地平早期即能减轻凝血酶致脑水肿作用。白无明显变化,.可导致神经细胞可逆性损伤,蛑饕造成神经细胞不可逆损伤。小时傻贾律窬赴蛲觯涞蛲龈叻迨奔湓∈保沙中一周以上,小剂量凝血酶无此变化。水蛭素能特异性抑制凝血酶的作用,而钙离子拮抗剂可减少或延迟凋亡细胞的出现:凋亡细胞.,大剂量凝血酶组与尼莫地平组比凝血酶可早期小时鹈飨阅运祝涓叻迨奔湮∈保天后水肿逐渐消退并趋于正常,而生理盐水、小剂量凝血酶无明显致水肿作用。凝血酶致脑水肿作用可被特异性抑制剂水蛭素有效⒋蠹亮磕C冈缙∈即能引起细胞骨架蛋白的变化,.小时可迸一步导致可逆或不可逆损伤,天则主要造成神经细胞不可逆损伤即坏死;而生理盐水、小剂量凝血酶无此作用。水蛭素可拮抗凝血酶的这种作用,而钙离子拮抗剂崮5仄则能减轻或延缓凝血酶的这种作用:尼莫地平组窬赴羌艿建立动物模型后各时相点大剂量凝血酶组凋亡细胞数与其余各组比崮5仄阶橛肫溆喔髯楸萈.,大剂量凝血酶组与尼莫地平组比菀陨辖峁崾荆捍蠹亮磕C冈缙始增多,并于以后各时相持续缓慢增加,而始终未达峰值。结论⒋蠹亮磕C缚稍缙引起明显脑水肿,其高峰时间凝血酶对实验鼠脑细胞毒性损伤机制的研究摘要
为.,天后水肿逐渐消退且趋于正常,凝血酶致脑水肿早期即能减轻凝血酶致水肿作用。本研究提示如能在脑出血早期水蛭素可拮抗凝血酶作用,而钙离子拮抗剂尼莫地平则能减轻或延元树突、轴突和胶质细胞突起的退变造成细胞损伤。总之,凝血酶可导致脑水肿,脑细胞的可逆或不可逆损伤,以及脑细胞凋亡。上述作用最早出现于造模后∈保涓叻迤谠作用可被其特异性抑制剂水蛭素有效抑制,钙离子拈抗剂尼莫地平别是∈保∈保赫庖皇逼诳赡苁侵瘟颇猿鲅5墓丶逼有效抑制凝血酶的致水肿作用缬盟嗡丶澳崮5仄降,将会明显减轻脑出血后脑水肿程度,改善脑出血的预后,这也为临床更好地治疗脑出血提供了新的思路。⒛C冈缙即能引起细胞骨架蛋白的变化,至可造成不可逆的神经细胞损伤,天则主要造成神经细胞坏死,缓凝血酶对脑细胞的毒性作用,起保护神经的作用,为进一步治疗赢得时间。由以上结论可推测早期脑水肿是由于凝血酶对脑细胞的毒性作用所致,这种作用赡芡üC甘芴宕ǖ可引起神经⒋蠹亮磕C傻贾律窬赴蛲觯缙即出现,其高峰时间在~小时,可持续芤陨希嗡啬芴匾性地抑制凝血酶的作用,而钙离子拮抗剂可减少或延迟凋亡细胞的出现。脑出血后血肿释放的凝血酶是早期诱导细胞凋亡的重要因素,如能尽早抗凝血酶治疗或抗凋亡治疗臼笛榻峁崾咀詈迷时内D猿鲅V瘟铺峁┬碌耐揪丁凝血酶对实验鼠脑细胞毒性损伤机制的研究摘要
关键词:⒛咱似、脑秒⑾赴纳、尼羔步平⑾小时,如能在这一时期内