Lactadherin对脐血树突状细胞及大鼠肠道免疫功能的影响.pdf

上海交通大学医学院硕士研究生学位论文 V Lactadherin 对脐血树突状细胞及大鼠肠道免疫功能的影响摘要目的: 本课题旨在探讨乳凝集素( Lactadherin )对脐带血树突状细胞表面分子表达、细胞因子、外泌小体分泌,及对轮状病毒感染 SD 大鼠肠道细胞因子分泌的影响,来了解乳凝集素对机体免疫功能的可能作用机制。为以后对乳凝集素的进一步研究和运用提供理论和实验依据。方法: 体外诱导培养树突状细胞,用乳凝集素干预,流式细胞仪检测细胞表面分子表达的阳性率, ELISA 方法检测树突状细胞分泌的细胞因子及 Western blot 方法测定其分泌的外泌小体。另外构建轮状病毒感染 SD 大鼠模型,用乳凝集素干预后, ELISA 方法检测肠道分泌细胞因子的变化。结果: ( 1)予乳凝集素干预树突状细胞后,能上调细胞表面分化分子 CD11c 和 CD1a 的表达,而对 CD14 分子影响不明显。对树突状细胞成熟标记的影响是:在未予 TNF- α诱导成熟的树突状细胞,其表达的 CD83 和 CD86 分子有上调作用;而予 TNF- α诱导成熟的树突状细胞, 其表达的 CD83 和 CD86 分子有下调作用。对 MHC Ⅱ分子无明显影响。( 2 )乳凝集素能减少未予 TNF- α诱导成熟的树突状细胞分泌 IL-12 、 IL-10 、 IL-6 和 INF- γ, 同时促进予 TNF- α诱导成熟树突状细胞分泌 INF- 上海交通大学医学院硕士研究生学位论文 VI γ;而对其分泌的 IL-4 无明显影响。( 3)乳凝集素促进树突状细胞分泌外泌小体。( 4 )乳凝集素干预后,能减轻轮状病毒感染大鼠临床症状及促进大鼠肠道分泌抗炎因子 IL-2 和 INF- γ。结论: ( 1 )乳凝集素通过上调细胞表面 CD11c 和 CD1a 分子表达, 可能有促进脐血单个核细胞向树突状细胞分化作用。( 2 )乳凝集素通过对树突状细胞表面 CD83 和 CD86 分子表达及细胞因子( IL-10 、 IL-12 、 IL-6 )分泌的调节,推测其一方面能增强机体抗病原体作用,另一方面在预防机体自身免疫性疾病方面有一定积极作用。( 3 )乳凝集素促进了树突状细胞外泌小体分泌,其可能提升了机体对外来抗原的反应能力。( 4 )乳凝集素促进轮状病毒感染大鼠肠道分泌抗炎细胞因子 IL-2 和 INF- γ。关键词: 乳凝集素,轮状病毒,大鼠,脐带血,树突状细胞,外泌小体上海交通大学医学院硕士研究生学位论文 VII THE INFLUENCE OF LACTADHERIN ON THE IMMUNE FUNCTION OF RAT’S INTESTINAL TRACT AND CORD BLOOD DENDRITIC CELLS ABSTRACT Objective: To explore the effect of lactadherin on phenotype, cytokine and exosomes secretion of cord bloo d dendritic cells, and the influence of lactadherin on the immune function of SD rat’s intestinal tract infected by rotavirus. To investigate the possible immunological regulation mechanisms of lactadherin, and provide the therotical basis to the research and application of the lactadherin. Method: lactadherin intervented dendr itic cells, the expression of differentiation and maturation markers on dendritic cells we re determined by immunofluorescence staining and flow cytometry. The levels of cytokines and the exosomes level were dete rmined by ELISA and Western Blot respectively. To construct model of ro tavirus infection rat, intervented by lactadherin, then the level of cytokine