Lowry法蛋白浓度测定试剂盒使用说明.docx

Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒使用说明
Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒使用说明
Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒使用说明
货号： PC0030
规格： 1000T（ 微孔 ）
保存：BSA蛋白标准品4c保存有效期至少3个月，-20C保存有效期至少一年，其他
试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存， Folin 酚乙试剂颜色变 成深绿色即失效。
Folin 酚甲试剂 A Folin 酚甲试剂 B Folin 酚乙试剂 （1N）
PBS 稀释液
BSA 蛋白标准品 （5mg/ml）
100ml X25ml 20ml 30ml 1ml
Folin- 酚试剂法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质
- 铜络合物；第二步是此络合物将 Folin 试剂还原，产生深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量
成正比。定量范围为 5〜100g/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱
氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白
质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
根据需要量，取适量 Folin 酚甲试剂 A 和 B 按 50:1 混合，混合后有效期为 24 小
时，过期失效。
根据需要量，取适量 。
若采用酶标仪法 （96 孔）
将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到96孔板中，力口 PBS补足到20ul。
将样品作适当稀释 （最好多做几个梯度 ） ，加 20ul 到 96 孔板的样品孔中。由于移液
器在取小量时的误差，标准线前面的点误差比较大，所以尽可能的让样品点落在标准线
1/2 后。
将配好的 Folin 酚甲试剂每孔加入 200ul ，轻轻震动，混匀，室温放置 10 分钟。
各孔加入 20 微升 Folin 酚乙试剂，迅速混匀， 37℃放置 30分钟。用酶标仪测定
A650计算蛋白浓度。
若采用分光光度计法（接上述步骤 2）
取八支（或者更多） 5ml 离心管，标号，按下表加入试剂。
混匀， 37℃放置 30 分钟。分光光度计测定 A650 计算蛋白浓度。
PC0001BSA 标准品（ 5mg/ml）
PC00155< G250（蛋白定量用）
PC0021BCA 试剂
PC0020BCA 法蛋白浓度测定试剂盒
Folin 酚甲试剂 A 100ml x 2
Folin 酚甲试剂 B 5ml
Fo