高效液相色谱仪器的使用.ppt

高效液相色谱仪器的使用
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仪器的构造原理
实验前的准备工作
开 机 程 序
化学工作站简介
关 机 程 序
仪器的维护和保养
第二页，共22页
仪器的构造原理
第三页，共22页
第四页，共22页
实验前的准备工作
滤膜的选择
流动相应该：HPLC 级
过滤： ( mm, mm最好)
脱气，尤其在低流速时
互溶
准备流动相
选择合适的滤膜
聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，
醋酸纤维滤膜：适用于水基溶剂，不适用于有机溶剂。
尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，不适用于DMF二甲基甲酰胺。
注意：1，每张滤膜只能用一次。
2，水相和有机相不要搞混。
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流动相使用时的注意事项？
1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或重蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围；
2、水需经常更换〈一般不超过2天〉,防止长菌变质；避免溶剂瓶直接日照。-。
3、使用双泵时, A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐,则A、D (进液口位于混合器下方〉放置含盐流动相,B、C (进液口位于混合器上方〉放置不含盐流动相A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶,用于存放水相流动相。
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样品的准备：
1、采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒；
2、用流动相或比流动相弱的溶剂制备样品溶液,尽量用流动相制备样品溶液；
3、手动进样时, 进样量尽量小, 使用定量管定量时, 进样体积应为定量管的3~5倍；
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溶剂截止波长
溶 剂
UV截止波长（nm）
乙 睛
190
水
190
环 己 烷
195
己 烷
200
甲 醇
210
乙 醇
210
乙 醚
220
二氯甲烷
220
氯 仿
240
四氯化碳
265
四氢呋喃
280（220）
甲 苯
285
所以，波长应至少比所用溶剂的截止波长大20nm以上。
在使用紫外检测器时，所用波长与所用溶剂的截止波长接近（或低于截止波长）时，容易产生噪音干扰，从而影响检测结果。
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开机（关）程序
1、打开Seal Wash清洗液开关，调节流速为2-3滴/min。
2、打开计算机，进入Window操作系统，并运行CAGBootp srever程序。
3、打开1100LC各模块的电源，等待仪器自检完毕，1-2min。
4、双击桌面上“Instrument 1 Online”图标，进入1100化学工作站。
开机操作：
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进入Windows系统后Bootp Server自动运行，电击将Bootp Server窗口最大化，开启仪器电源后上面会出现七行通讯信息记录，表明工作站通讯成功，可以进入Agilent化学工作站。
注意：不能关闭Bootp Server窗口，只能最小化，否则将影响工作站通讯。
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