病毒载体研究进展.ppt

病毒载体研究进展.ppt病毒(bìngdú)载体研究进展
第一页，共16页。
病毒(bìngdú)载体概述（1）
要求(yāoqiú)：1、携带外源基因并能包装成感染性病毒颗粒
2、介导外源基因转移和表达
3、对机体不致病
容量：自身(zìshēn)基因组大小的105%~110%
类型：1、重组型病毒载体


2、无病毒基因的病毒载体 复制缺陷型
可复制型
复制缺陷型
组成：1、病毒复制和包装元件
2、病毒基因
3、插入的外源基因或元件
4、病毒外壳/外膜
用途：基因转移和表达
1、基因治疗
2、疫苗
3、器官移植
4、组织工程
5、转基因动物
6、基因功能研究
第二页，共16页。
病毒载体(zàitǐ)概述（2）
优点：1、利用病毒天然的感染性进入(jìnrù)细胞，转导效率高；
2、复杂的装配过程由细胞完成；
3、不同的病毒载体具有不同的表达特点。
存在的问题：1、安全性
2、靶向性
3、有效性
细胞毒性
染色体毒性
免疫毒性
转导靶向性
转录靶向性
转导效率
靶向性
基因表达水平和持续时间
表达的可调控性
第三页，共16页。
常用的病毒(bìngdú)载体的特点：
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病毒载体(zàitǐ)研究方向
1、病毒包装(bāozhuāng)系统
2、无病毒(bìngdú)基因的病毒(bìngdú)载体
6、自我扩增型病毒载体
7、条件增殖型病毒载体
5、嵌合型病毒载体
3、靶向性病毒载体
4、可调控表达的病毒载体
8、新病毒载体
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病毒载体包装(bāozhuāng)系统
组成：1、宿主细胞
2、辅助(fǔzhù)元件（辅助(fǔzhù)质粒、辅助(fǔzhù)病毒）
3、被包装的DNA/RNA 包含顺式作用元件
单因素(yīn sù)生产系统（one-component system)
双因素生产系统 (two-component system)
gag pol env
LTR
LTR

图1 反转录病毒包装系统示意图
图2 腺病毒包装系统示意图
293 cell
E1a,b
JM17
Ad
Shuttle
293 cell
E1a,b
第六页，共16页。
多因素(yīn sù)生产系统 (multi-component system)
多因素系统 双因素系统
图3 腺病毒伴随(bàn suí)病毒包装系统示意图
host cell
Helper virus
Helper plasmid
rep cap
Vector plasmid
Host cell +vector DNA
Helper virus +helper plasmid
图4 双因素(yīn sù)系统生产重组AAV病毒示意图
proviral cell
Recombinant helper virus
(rHSV-repcap)
rep cap
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无病毒(bìngdú)基因的病毒(bìngdú)载体
被包装(bāozhuāng)的DNA/RNA中不含任何病毒编码基因，只保留其复制和
包装(bāozhuāng)所必需的顺式作用元件。获得的重组病毒颗粒具有野生型病
毒的外壳/外膜和感染性，但不表达病毒蛋白。
腺伴随病毒(bìng