沙培林抑制胃癌sgc7901细胞增殖并诱导凋亡机制的研究.doc

上海交通大学
硕士学位论文
沙培林抑制胃癌SGC7901细胞增殖并诱导凋亡机制的研究
姓名:李宁
申请学位级别:硕士
专业:外科学(普外)
指导教师:吴克瑾;欧敬民
20080401
中文摘要
沙培林抑制胃癌 SGC7901 细胞增殖并诱导凋亡机制的研究
摘要

目的

观察沙培林作用于胃癌细胞后,细胞增殖状况、细胞周期及
p53、p27kip1、PCNA 蛋白表达的变化以及对胃癌细胞凋亡的影响,初步
探讨沙培林诱导胃癌细胞凋亡的分子生物学机制。
方法

(1) 选取人胃癌细胞株 SGC7901,常规体外培养;(2)以不同
浓度梯度的沙培林(0、、、 和 KE/ml)处理 6h、12h、
24h 和 48h 后,噻唑蓝(MTT)比色法观察 SGC7901 细胞的生长情况;
(3) KE/ml 沙培林作用于胃癌 SGC7901 细胞 48h 后,流式细胞仪检测
细胞周期的变化情况;(4)免疫细胞化学染色观察药物处理前后的 p53、
p27kip1、PCNA 蛋白的表达变化;(5)沙培林 KE/ml 处理 48h 后,荧
光染色观察细胞凋亡情况;膜连蛋白 V-硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin
V-FITC/ PI)凋亡试剂盒观察沙培林作用后 SGC7901 细胞的凋亡情况;
(6)半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测沙培林处理后细胞凋
亡相关基因 survivin、caspase-3 mRNA 的表达变化情况。
结果

(1)沙培林对于 SGC7901 胃癌细胞具有抑制增殖效应,并在
一定范围呈现时间和浓度相关性;(2)沙培林( KE/ml)作用 48h 后,
中文摘要
细胞周期检测发现:与空白对照组相比,SGC7901 细胞 G0/G1期细胞下
降,S 期细胞增多(P <);(3)免疫细胞化学结果显示:沙培林处理
可使 SGC7901 细胞 p53 蛋白阳性表达率下调,p27kip1 蛋白阳性表达率上
调,与对照组相比差异有统计学意义(P <);PCNA 蛋白表达组间
无统计学差异(P >)。(4)沙培林可以诱导胃癌 SGC7901 细胞发生
凋亡。Annexin V-FITC/ PI 凋亡检测结果显示:沙培林实验组细胞凋亡
率显著高于空白对照组( P <)。(5)半定量 RT-PCR 检测发现:沙培
林刺激使胃癌 SGC7901 细胞 survivin mRNA 表达减少,caspase-3 mRNA
表达增多,与正常对照组相比有显著差异(P <)。
结论沙培林在体外可以抑制胃癌 SGC7901 细胞增殖,改变
SGC7901 细胞周期分布;使胃癌细胞 p53 蛋白表达减少,p27kip1 表达增
加。沙培林诱导胃癌 SGC7901 细胞发生凋亡,凋亡发生的分子生物学
机制可能与 survivin mRNA 表达下调,caspase-3 mRNA 表达上升有关。
关键词沙培林,SGC7901 细胞,胃癌,凋亡,Survivin,Caspase-3
英文摘要
STUDY ON MECHANISMS OF INHIBITING
PROLIFERATION AND INDUCING APOTOSIS OF
HUMAN GASTRIC CANCER CELL LINE SGC7901 BY
SAPYLIN
ABSTRACT
OBJECTIVE To investigate effect of Sapylin on changes of Human
Gastric Cancer Cell, including the cell proliferation,cell cycle and the
expressions of p53, p27kip1 and PCNA. To study the apoptosis of Gastric
Cancer Cell induced by Sapylin and discuss its primary molecular
mechanisms.
METHODS (1) Human Gastric Cancer Cells SGC7901 were cultured in
vitro. (2) SGC7901 cells were treated with 0、、、 and KE/ml
Sapylin for 6、12、24、48 hours respectively. (3) The cell growth condition
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