血清蛋白质醋酸纤.ppt

血清蛋白质醋酸纤
*
第一页，课件共26页
实验目的：
掌握电泳的基本原理，了解电泳仪﹑电泳槽的基本结构与功能。
熟悉电泳的基本过程与定量方法。
熟悉血清电泳在临床诊断中的作用。
*
第二页，课件共26页
1、电泳（electrophoresis）法
带点粒子在直流电场中向着相反电极移动的现象称为电泳。
*
第三页，课件共26页
电泳原理：在一定pH条件下，不同的质点由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，即它们的电泳迁移率不同，因此，可使它们分离。
影响电泳迁移率的外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象
影响电泳迁移率的内在因素：质点所带净电荷的量、质点的大小和形状
*
第四页，课件共26页
常见的电泳技术：





*
第五页，课件共26页
采用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法称为醋酸纤维素薄膜电泳。
醋酸纤维薄膜：将纤维素的羟基乙酰化为醋酸酯，溶于丙酮后制成有均一细密微孔的薄膜，～
*
第六页，课件共26页
*
第七页，课件共26页
优点：


3. 需加样量少
4. 亲水性小
*
第八页，课件共26页
+
白蛋白(A)
α1
α2
β
γ
实验原理：，，并且蛋白质的分子量、立体构象、等电点以及形状也有差异，在电场中迁移速度不同，可以在醋酸纤维薄膜上分离成A、α1、α2、β和γ五条区带。
蛋白名称
等电点
分子量
白蛋白

69000
α

α1：20000
α2：30000
β

90000-150000
γ
-
156000-300000
*
第九页，课件共26页
三、实验器材
1. 电泳仪：为电泳提供直流电源。
2. 电泳槽：为电泳提供场所。多用有机玻璃制成，电极用铂丝。
3. 血清加样器 ：可用盖玻片或X胶片或微量加样器。
4. 醋酸纤维素薄膜：2cm×8cm
5. 其它： 培养皿（直径9-10cm）、滤纸、玻璃板、镊子等。
DYY-5型稳压
稳流电泳仪
DYY-Ⅲ型
电泳槽
*
第十页，课件共26页