实验题目血红蛋白测定和红细胞计数课件.ppt

实验题目血红蛋白测定和红细胞计数
试验目要求:
经过血红蛋白测定、红细胞计数试验要求:
1、掌握红细胞计数、血红蛋白测定原理、方法及注意事项。
2、掌握血细胞计数板结构
一、血红蛋白测定(Hemoglobin简称Hb)
（氰化高铁血红蛋白法）
【原理】
血红蛋白中亚铁离子（Fe2+）被高铁氰化钾氧化成高离子（Fe3+）, 血红蛋白转化成高铁血红蛋白, 高铁血红蛋白与氰离子（CN-）结合, 生成稳定氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在540nm波长比色。从HicN参考液制作标准曲线上读取血红蛋白克数。
【操作】
取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟后用721光电比色仪, 540nm波长, 试剂为空白调0点比色, 读取光密度, 查标准曲线得结果。
红细胞计数(red blood cell简称RBC)
——显微镜直接计数(试管法)
【原理】
一定量血液经一定量等渗性稀释液稀释后, 充入血细胞计数池中显微镜下计数一定容积内细胞, 再换算成每升标本细胞数汇报。
【操作方法】
l、, 放入一小试管内。
2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。
3、擦去管尖外部余血将血液快速轻轻吹入盛有红细胞稀释液试管内, 吸上清液嗽洗吸管2-3次, 立刻摇匀。
4、用玻棒取混悬液少许, 充入计数池内。
5、待2—3分钟, 让红细胞完全下沉后, 将计数板平放在显微镜台上, 用低倍镜观察, 如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数区域:
中心大方格中5个中方格(正中一个和四角各一个)。