分子荧光法测定水杨酸乙酰水杨酸1.doc

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分子荧光法测定水杨酸和乙酰水杨酸
一、实验目的
1、学习荧光分析法的基本原理。
2、掌握应用分子荧光法测定乙酰水杨酸、水杨酸的分析方法。
3、了解 F-3501 型荧光分光光度计的主要结构及工作原理，掌握其正确的使用方法。
二、实验原理
某些物质经紫外光或波长较短的可见光照射后， 会发射出较入射波长更长的荧光。 荧光 光谱反映了物质的特性， 建立在测量荧光光谱基础上的分析方法称为荧光分析法。 当进行荧 光测定时， 总要选择不同波长的光波进行测定， 即一个为激发光——物质所吸收的光； 另一 个为物质吸收后发出的光称为发射光或荧光。
对同一物质而言，在稀溶液（即 A = abc < ）中，荧光的强度 F 与该物质的浓度 C 有以下关系：
F = gibclo
式中g为荧光过程的量子效率，a为荧光分子的吸光系数，b为试样的吸收光程，I。为入射 光的强度。当Io及b不变时，上式变为：
F= KC
其中， K 为常数。
荧光分析法具有灵敏度高（一般超过分光光度法 2~3 个数量级）、取样少、方法快速等 特点，现已成为食品、生物医药、天然产品、农业、环境保护、化工等领域中的重要分析方 法之一。但由于许多物质本身不会发生荧光，故在使用范围上受到一定的限制。
乙酰水杨酸（ASA，即阿司匹林）水解能生成水杨酸（ SA），而在乙酰水杨酸中，或多
或少都存在着水杨酸。 由于两者都有苯环， 也有一定的荧光效率， 因而在以三氯甲烷为溶剂 的条件下，可用荧光法进行测定。 从乙酰水杨酸和水杨酸的激发光谱和荧光光谱中可以发现： 乙酰水杨酸和水杨酸的激发波长和发射波长均不同， 利用此性质， 可在各自的激发波长和发 射波长下分别测定。
三、仪器与试剂
1、仪器
F-3501 型荧光分光光度计、电子天平、离心机、真空泵、石英比色皿、移液管、棕色 容量瓶、比色管、烧杯、砂芯抽滤装置、量筒、洗耳球、洗瓶等。