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细胞生物实验报告.doc


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细胞生物实验报告
of rural drinking water sources, protection of drinking water sources in rural areas by the end of thees in rural areas by the end of the delimitation of the scope of protection, complete with warning signs, isolating network protection facilities
素,使纺锤体微管解聚,这样细胞停留在中期,可以获得大量的分裂细胞。用低渗盐溶液()处理,使其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去然后用Carnoy固定液固定,最后以气干法制片,可获得较好的染色体标本。
核型(karyotype)指一个细胞中的整套染色体,按其大小、形态特征顺序排列所构成的图像。通常是将显微摄影得到的染色体照片剪贴而成。在完全正常的情况下,一个体细胞的核型一般可代表该个体的核型。组型(idiogram)是以模式图的方式表示,它是通过许多细胞染色体的测量取其平均值绘制成的,是理想的,模式化的染色体组成,代表一物种染色体组型的特征。将待测细胞的核型进行染色体数目、形态特性的分析,确定其是否与正常核型完全一致,称为核型分析(karyotype analysis)。这对于探索人类遗传病的发病机理,探讨动物和植物的起源,以及物种间的亲缘关系等都具有重要意义。
材料与方法

:人的静脉外周血(男女各2ml,在校医院添加肝素钠抽取血样)
:恒温培养箱(1)、电冰箱(1)、高压灭菌锅(1)、离心机(1)、普通光学显微镜(7)、显微摄影的照相机(1)、培养瓶(4)、离心管(4)、移液枪(2)、胶头(4)、滴管(4)、烧杯(4)、试管架、插管(5)、试剂瓶(4),载玻片(10)。
:肝素、完全RPMI—1640培养粉、秋水仙素、、植物血球凝集素(PHA)、青霉素、链霉素、小牛血清、秋水仙素、无水酒精、冰醋酸、Giemsa粉末、甘油、甲醇、1/15 mol/。


①接种和培养:在无菌工作台上,打开培养瓶的瓶塞,加入3ml培养基,然后再加入母液为5mg/mL PHA男1女1各加45ul使其终浓度为75ug/ml,男2女2各加50ul使其终末浓度处于83ug/ml,,轻轻摇匀 ,置37 ℃ 培养箱中培养72h 。
②培养细胞的秋水仙碱处理:培养终止前3h~4h将新鲜配制的50μg/mL秋水仙素工作液注入培养瓶中,,轻轻摇匀,放回培养箱中,继续培养至72h。

①低渗及离心:小心从培养箱取出培养瓶,用吸管将培养后的血细胞混匀,并移至离心管内,以1000r/min离心10min,吸弃上清液,加入8mL37 ℃/L氯化钾低渗液,用吸管上下吹打约10次,使细胞悬浮于低渗液中,置37 ℃ 水浴箱中,温育20min,,使低渗充分。
②固定:低渗终止后,加入新鲜配制的卡诺固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)1mL,预固定2min ,打匀,放入离心机内,以1000 r/min离心 8分钟min,倒掉上清液,继续加入固定液5mL,用吸管将沉淀的细胞轻轻吹打混合细胞悬液。室温下静置20min,以 1000r/min离心 8min,倒掉上清液。
of rural drinking water sources, protection of drinking water sources in rural areas by the end of the delimitation of the scope of protection, complete with warning signs, isolating network protection facilities
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  • 上传人玉玲珑
  • 文件大小8.69 MB
  • 时间2022-03-18