白细胞计数实验报告.doc

白细胞计数和分类
目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、
原理：各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏〔Wright’s〕染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细 白细胞计数和分类
目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、
原理：各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏〔Wright’s〕染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相比照值，以观察其数量、形态和质量变化，通过显微镜观察染色血涂片，计算血液中各类白细胞的百分率，称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率，即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。
实验器材： 香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、~、蒸馏水、计数板及专用盖片、针 1ml刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片
实验步骤
白细胞分类
1．血片制作：
取一滴血，滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜〔血膜不可过厚、过薄〕。将制好的血涂片晾干，不可加热。
注：〔1〕良好涂片标准：
１) 呈头、体、尾舌形
２) 血膜厚薄适宜
３) 两边留有空隙
〔2〕涂片好坏与以下因素有关：
1〕血滴大小
2〕推片与玻片之间角度
3〕推片速度
2、血涂片的染色步骤：
〔1〕用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于染色架上。
〔2〕滴加瑞氏染液，共计七八滴数，以盖满血膜为度，静置1分钟。
〔3〕再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液，轻轻摇动，并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀，静置15分钟。
〔4〕用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗，否那么沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中枯燥。或先用滤纸吸取水分迅速枯燥，即可镜检。
3、白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处〔一般在体尾交界处〕，在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数，计数移动时防止重复。根据所见到的100个白细胞，记录各种白细胞所占的百分数。
4、各类白细胞的形态特征
嗜中性白粒细胞：圆形，胞浆淡红色，胞浆内有多量紫红色细小颗粒〔染色不佳时那么看不清楚〕。核为蓝紫色。
嗜酸性白细胞：大小、形态与中性白细胞大体相似，唯胞浆内含有粗大的鲜红色颗粒。核多数为两叶。
嗜碱性白细胞：大小、形态与中性白细胞大体相似，但胞浆内含有粗大的深蓝色，常遮盖在核上。核分叶不明显
淋巴细胞：分大小两种，小淋巴细胞圆形，核染成深紫色，圆形或肾形，胞浆很少，常呈一小片月牙状，染成蓝色。大淋巴细胞，核圆形或肾形，胞浆相对较多，染成天蓝色，在胞浆与核之间有淡染带。有时内含少数紫红色大颗粒。
单核细胞： 核染成紫色，其染色质疏松，核形不规那么。胞浆较多，染成浅灰蓝色
白细胞计数
加稀释