实习二红细胞、网织红细胞检测.ppt

实习二红细胞、网织红细胞检测
工作总结
商务报告
商务展示
工作计划
计数
平放计数板于显微镜台上，先用低倍镜找到计数池的中央大方格。观察红细胞是否均匀，并调整至视野中间。
再转换高倍镜计数。镜下红细胞为圆表面活性剂可加速溶血，缩短转化时间，防止血浆蛋白改变引起的浑浊
[实验步骤]
，作为测定管
用血红蛋白吸管准确吸取全血20u1，擦去管端血迹，置于试剂中，冲洗3次，混匀
将混合液放置3分钟以后，倒入光径1cm比色皿，用分光光度计在540nm进行比色
以蒸馏水或HiCN稀释试剂作空白管，校正光密度到0点，读取测定管光密度读数
计算：                      
血红蛋白（g/L）= 测定管光密度×（64458/44000）×251             = 测定管光密度A ×
式中： （1）64458 是目前国际公认的血红蛋白分子量 （2）44000 是国际血液学标准化委员会公布的血红蛋白摩尔吸光度 （3）251是稀释倍数
[方法评估]
HiCN法操作简便，试剂单一，显色快且稳定，可以根据吸光度直接计算结果－－被列为国际血红蛋白测定的参考方法，也是我国推荐的首选方法
高球蛋白血症和白细胞明显增高－－可导致反应液浑浊而影响结果
[注意事项]
用吸血管吸血过程应仔细、认真，准确把握住吸入的血液量是初学者的一个难点，也是实验结果准确与否的一个关键
HiCN稀释液不能贮存在塑料瓶中，否则会使CNˉ含量下降，测定结果偏低－－应贮存在棕色有塞玻璃瓶中
4℃冰箱保存一般可用数月，但不能在0℃以下保存，因为结冰可引起高铁氰化钾还原，使溶液褪色失效
[注意事项]
分光光度计使用要点1、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调置使用波长。仪器预热20分钟。
2、打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“”。盖上试样室盖，将比色皿架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“”。
3调整仪器的“”和“100%”，将选择开置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度的值。
[注意事项]
氰化钾是剧毒品，配制稀释液时要按剧毒品管理程序保管、操作
配制好的HiCN稀释液中因氰化钾含量低，又有高铁氰化钾存在，毒性不是很大。若进入体内，高铁氰化钾氧化血红蛋白，生成高铁血红蛋白。后者结合CNˉ，起到一定的解毒作用，但仍应妥善保管
测定后的废液不能与酸性溶液混合－－氰化钾遇酸可产生剧毒的氰氢酸气体
为防止氰化钾污染环境，比色测定后的废液集中于广口瓶中－－应注意废液处理，可用除毒液除毒
除毒方法
取硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）二份加NaOH一份，在研钵中研细，配成100g/L的悬液。每1000ml废液加上述除毒液5ml，放置3小时，不时搅拌，使剧毒的氰化钾成为无毒的亚铁氰化钾
废液加入等量的水，混合后每升加次氯酸铋液 ( 安替福化 )35 毫升，充分混匀后敞开容器，置室温 15 小时后，排入下水道
参考值－－多次检查
红细胞数
血红蛋白
成年男性
（~）×1012/L
(400~550万/mm3)
120~160g / L
(12~16g / dl)
成年女性
（~）×1012/L
(350~500万/mm3)
110~150g / L
(11~15g /dl)
新生儿
（~）×1012/L
(600~700万/mm3)
170~200g / L
(17~20g /dl)
临床意义
红细胞及血红蛋白增多－－单位容积血液中 RBC 及血红蛋白量高于参考高限
　　－－可分为相对性增多和绝对性增多两大类
红细胞及血红蛋白减少－－单位容积循环血液中 RBC 、血红蛋白量及红细胞比积低于参考值低限，称为贫血。
贫血可概括为两大类：即生理性减少和病理性减少  
各种贫血红细胞与血红蛋白的减低不一定呈平行关系
RBC与Hb小结★
RBC
Hb
增多
减少
相对增多
绝对增多
原发增多
继发增多
Epo代偿性增多
Epo非代偿性增多
缺氧
肿瘤
真性红细胞增多症
脱水
生理性减少
病理性减少
儿童，孕妇，老人
生成减少
破坏增加
丢失过多
各种溶血
各种失血
造血干C障碍
DNA合成障碍
再障
巨贫
Hb合成障碍
多种机制
缺铁贫
白血病
造血原料缺乏