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不同检验方法对肺结核早期诊断的应用
金明勇摘要:目的:结合临床实践经验,探讨不同检验方法对肺结核早期诊断的应用。方法:采用对照研究法,选取2008年1月-2009年12月期间,对我院收治的56例肺结核患者的痰、胸水、血清进行多种方法检以及皮肤结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验,现将结果报道如下:
1对象与方法

选取2008年1月-2009年12月期间,对我院收治的56例肺结核患者以及54例非肺结核患者为研究对象,男62例,女34例,年龄16~79岁,±。
所有肺结核患者根据临床诊断,包括体征、病史、临床表现、胸部X线细菌学检查和抗结核治疗有效而确诊[5],部分患者接受CT、胸膜活检、纤支镜检查而确诊,非结核经病理学检查,患者病情分类见表1。

采用对照研究法,对我院收治的56例肺结核患者的痰、胸水、血清进行多种方法检验,包括涂片结核菌检查、聚合酶链反应(Polyerase Chain Reaction PCR)和及皮肤结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验,并选取同时期的非结核患者作为对照组,比较检验结果,以确定不同检验方法在诊断上的应用意义。采用MicrosoftExcel建立数据库,运用SPSS 13. 0统计软件进行统计分析。

标本取痰标本为患者晨起深呼吸后,由肺部深处咳出的分泌物。同时送涂片和PCR检测。① 涂片法:采用WHO推荐的国际通用螺旋盖痰瓶收集痰标本,痰涂片标本及时送检,用改良齐―尼氏法进行抗酸染色,并用显徽镜检查,阳性标准为:观察100个视野,发现3~9条者。②PCR诊断:由军事医学科学院放射医学研究所提供的引物及PCR诊断试刺盒进行检验。NDA标本取痰()加1N的NaoH溶液(5μL),37℃温度下放置40min后,离心5min,转速10000rpm。将上清丢弃,并用生理盐水洗至中性备用。,离心、沉淀后加入50μL裂解液沸水浴10min,离心5min,转速10000rpm。取5μL上清液,作为TB-DNA模板。,混匀后加入石蜡油20μL封顶,再加入5μL,标本DNA液,离心后扩增,分别设置为90℃(30s)、55℃(30s)、72℃(60s),共循环35次,取10~30mLPCR扩增液直接上样于2%琼脂糖凝胶进行电泳,阳性标准为:在紫外线下观察有160bp的橙黄色荧光带。③皮肤PPD试验:卫生部上海生物制品研究所北京华怡生物技术公司提供的PPD液,于左前臂内侧皮内注射(),阳性标准为:72h观察局部肿结直径大于5~10mm。
2结果
56例结核病患者和54例非结核病患者的痰和血清及23例胸腔积液患者的胸水均接受上述3种方法的检测,①痰标本与血清标本PCR检测结果结果详见表2与表3。结核胸膜炎胸腔积液23例患者的胸水接受PCR检测,%(20/23),3例呈阴性,之后经胸膜活检以及抗结核治疗吸收而证实;②痰和胸水涂片作抗酸杆菌检查,结果详见表4。③PPD皮试结果,%(18/56),%(11/54)。三种方法结核患者检出率差别