菌落总数不确定度.doc

微生物菌落总数不确定度目前, 国际上统一使用的对检测和校准实验室能力的通用要求是 ISO/IEC17025 : 2005 , 在内容和技术要求方面强化了评定测量不确定度。中国实验室国家认可委员会(CNAL) 充分考虑目前国际上与合格评定相关的各方对测量不确定度的关注,以及测量不确定度对测量、实验结果的可信性、可比性和可接受性的影响,特别是这种影响和关注可能会造成消费者、工业界、政府和市场对合格评定活动提出更高的要求。因此, 认可委员会在认可体系的运行中给予测量不确定度评定以足够的重视,满足了客户、消费者和其他方面的期望和需求。食品的质量直接关系到消费者的身体健康,食品中微生物的测量是食品质量优劣的重要卫生指标之一, 文中介绍了实验室按 GB/T4789 . 12- 2010 方法对 10个牛初乳粉样品菌落总数测试结果的不确定度评定方法。一、原理与方法 1. 测试原理不确定度定义为:表征合理地赋予被测量之值的分散性,与测量结果相联系的参数。根 BLAC/AG05 附录规定进行菌落总数测试要求: 测试样品是均匀的, 每个样品都包含可计算得出数目的微生物; 在实验室由不同人员按规定的测试方法进行一段时间测试; 每个样品均做平行样, 必须由同一测试人员进行操作。测试完成后得到的测试结果取对数, 即可用于菌落总数不确定度的评定。 2. 测试方法依据中华人民共和国国家标准 GB/T4789 . 12- 2010 进行测试。以无菌操作,将检样 25g 放入含有 225ml 灭菌生理盐水的无菌均质袋内,经充分振摇后制成 1: 10 的均匀稀释液。根据食品卫生标准要求或对样本污染情况的估计,选择 2~3 个稀释度,每个稀释度做两个平皿。然后将有稀释液的平皿内注入 45℃左右营养琼脂约 15ml 转动混匀,同时做空白对照, 待琼脂凝固后, 翻转平皿, 放置 36 ℃± 1℃恒温箱内培养 48± 2h。计数后以同稀释度的两个平皿的平均菌落数报告。, 而样品中细菌分布的均匀性和重复测量带来的不确定度是影响结果准确度的主要原因,而 B 类不确定度分量对合成不确定度影响较少。所以数学模型可简单设计为: A=X(cfu/g) 菌落总数为 A ,试验结果为 X 三、测定不确定度评定此测定不确定度评定是对一组样品的重复测量进行评定。准备十份微生物含量可能不同的牛初乳粉样品, 通过对十份样品的检测, 得到每个样品的菌落总数含量。每份样品做两个平行,第 j 个样品的两次测量结果为 X 1j和X 2j, 采用合并样本方差进行计算。检测结果和计算过程如下表所示: 序号检测结果残差平方和取值区间 jX 1jX 2j—X —X± 150 1 1431 1527 1479 4608 1281 1629 2 1338 1169 1254 14450 1104 1404 3 1547 1469 1508 3042 1358 1658 4 1110 1234 1172 7688 1022 1322 5 1209 1253 1231 968 1081 1381 6 1739 1432 1585 47125 1435 1735 7 1643 1427 1535 23328 1385 1685 8 2142 2563 2352 88621 2202 2502 9 914 113