新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程.doc

新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程
1、目的
为规范输血科HDN血型血清实验诊疗的技术操作，保证检
测结果正确，明确HDN诊疗及其原因，依据《输血实验室管理
程序》
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程
1、目的
为规范输血科HDN血型血清实验诊疗的技术操作，保证检
测结果正确，明确HDN诊疗及其原因，依据《输血实验室管理
程序》。
2、合用范围
本文件合用于本院输血科对HDN进行血型血清学实验诊疗
及其实验操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理
：微柱凝胶卡式法
：本微量定型系统凝胶测试法鉴于生物化学凝胶过滤技
术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反响。当抗原抗体反响，
抗人球试验时，血细胞发生凝聚。离心时凝聚块不能经过凝胶间
隙而留在凝胶上层，呈阳性反响，未凝聚细胞离心时可经过凝胶
空隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反响。
5、样本采集和办理
取患儿不抗凝血1-2ml及EDTA-K2抗凝血3～4ml,24小时内
送检。将不抗凝血离心分别出血清备用。
6、试剂：
%的生理盐水；
；
（市售）、抗B（市售）、抗A+B（健康O型人血清）、
抗D标准血清；
%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液；
；
7、仪器：
XTL-；
2)
DiaMed-IDIncubator37S
Ⅰ温育器；
3)
DiaMed-IDCentrifuge12S
Ⅱ
：
婴儿及母亲ABO血型判定是检查第一步，以便考虑此后进
一步检查程序。
如母子ABO不合（母O子A、B，母A子B、AB，母B子A、
AB）则按下列步骤进行患儿血液三项试验：
⑴直接抗人球蛋白试验（DAT）（微柱凝胶卡式法）
取患儿不抗凝血离心后，%%的红细
胞悬液。
在戴安娜LISS/Coombs卡上注明患儿的姓名或编号，撕开卡
上的铝箔，加入配好的患儿红细胞悬液50μl。
将卡放入戴安娜离心计离心10分钟后判读结果。
结果察看：
阳性：红细胞凝聚，在凝胶柱中或表面形成红线。
阴性：在微管底部形成密集的细胞扣。
⑵患儿红细胞抗体放散试验
7)患儿红细胞用大量生理盐水洗涤三次，取压积红细胞1ml左
右，加等量的生理盐水混匀。
将上面备好的红细胞悬液置57℃的水浴箱中振荡10分钟后取出，立刻以2000转/分别心2-3分钟。
吸上层红色液体（即放射液）于清洁试管中备用。