红细胞计数和血红蛋白测定.ppt

红细胞计数和血红蛋白测定
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概述：
血液由血浆和血细胞两部分组成。通过循环系统与全身各个组织器官密切联系参与机体各项生理功能活动，维持机体正常新陈代谢和胎儿主要
Hb， HbF 占2%以
下）
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二、红细胞计数
（一）原理：
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数（用已校准的一次性微量采血管或Hb吸管，），滴入血细胞计数盘内，然后于显微镜下计数一定范围内的RBC数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。
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（二）试剂
枸橼酸钠（2Na3C6H5O7·11H2O），3克
甲醛（40%） 1ml
以上溶解后加蒸馏水 100ml
此配方克服了传统的Hayem液的缺点。
（三）操作
见课件
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（四）参考值
RBC（×1012/L） Hb（g/L）
男： ~ 120~160
女： ~ 110~150
新生儿： ~ 170~200
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（五）临床意义
升高：相对升高——与脱水有关（吐、泻、汗、尿、灼、
癌）
绝对升高——与乏氧有关
生理性（高原、胎儿、新生儿、运动、精神因素）
病理性（心肺疾患、真性红细胞增多症）
降低：生理性降低——妊娠、婴幼儿、老年人
病理性降低——生成降低、原料不足、造血障碍、
丢失增多（失血）、破坏增多（溶血）

由于各种病因导致周围血红细胞减少，即病理性贫
血其贫血的病因学分类见第9页“表2-1”
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三、血红蛋白测定
（一）血红蛋白测定方法
改良沙利（Sahli）氏法
托尔克维斯脱（Tallgvist）氏法
光电比色法
硫酸铜溶液比重法
酸化（碱化）光电比色法
氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法
十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）测定法
碱羟高铁血红素（AHD-575）法
上机分析
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（二）氰化高铁血红蛋白（HiCN）法
原理：
血红蛋白被高铁氰化钾[K3Fe（CN）6]氧化成高铁血红蛋白（Hi）再与氰离子（CN-）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋（hemigl-obin Cyanide，简称HiCN）。氰化高铁血红蛋白在波长540nm处有吸收峰，可用校准的高精度分光光度计进行直接定量测定。或用HiCN参考液进行比色测定。
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试剂：常用的Hb转化液为文齐氏液（见实习指导）
静置
操作：血液20ul+转化液5ml———比色
5分钟
计算：