触酶试验氧化酶试验.docx

触酶试验
原理:
触酶又称过氧化氢酶,具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,继而形成氧分子,出现气泡。
⑵方法:
取洁净玻片1张,用接种环挑取细菌,加3%H2O21滴,立即观察结果。
⑶结果:
若立即出现大量气泡触酶试验
原理:
触酶又称过氧化氢酶,具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,继而形成氧分子,出现气泡。
⑵方法:
取洁净玻片1张,用接种环挑取细菌,加3%H2O21滴,立即观察结果。
⑶结果:
若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。
⑷应用:
大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶,但链球菌科阴性,故常用此试验来鉴定。此外,金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验,结核分枝杆菌为阴性,戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。注意事项:
①3%H2O2溶液要新鲜配制。 ②不宜用血琼脂平板上生长的菌落,
因红细胞含有触酶,可致假阳性反应。 ③取对数生长期的细菌。
氧化酶试验
原理:氧化酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
试剂:1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。
方法:常用方法有三种;
菌落法:直接滴加试剂于被检菌菌落上。
滤纸法:取洁净滤纸一小块,沾取菌少许,然后加试剂。
试剂纸片法:将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片,取菌涂于试剂纸上。
结果:细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色,为阳性。为保证结果的准确性,
分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。
应用:主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别,前者为阴性,后者为阳
性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。
(萎一倪二氏法)

%乙醇10mL5%酚水溶液90mL将品红溶解于乙醇中,然后与酚溶液混合。
3%盐酸一乙醇浓盐酸3mL95%乙醇97mL
。;95%乙醇30mL;%氢氧化钾溶液100mL;将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。