南医微生物实验二课件.ppt

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实验内容
1、录像:免疫标记技术
2、介绍:血清学反应
3、示教:单扩、双扩、火箭电泳、
对流免疫电泳、淋转、E花环
4、操作:玻片凝集
血清学反应
★抗原与相应抗体相遇可发生特异性结合,在外界条件影响下呈现肉眼可见的反应。实验所用抗体通常存在于血清中,故名。
特异性
可逆性
结合物的可见性与带现象
前带现象:抗体过剩后带现象:抗原过剩比例适当:较大的晶格状
免疫复合物
★特点(抗原抗体反应的特点)
★血清学反应的种类
1)凝集反应(agglutination)
2)沉淀反应(precipitation)
3)补体结合试验(complementfixationtest,CFT)
4)中和反应(neutralization)
5)免疫标记技术
抗原的分类与抗原抗体反应的分类
颗粒性抗原
凝集反应
可溶性抗原
沉淀反应
(二)沉淀反应
概念:可溶性抗原+抗体沉淀物
单向琼脂扩散、火箭电泳:抗原定量试验
抗体琼脂板、抗原扩散(自由、定向)
双向琼脂扩散、对流免疫电泳:抗原分析、
抗原定性试验等
抗原、抗体同时扩散(自由、定向)
单向琼脂扩散
单向琼脂扩散试验是一种定量试验。
将一定量已知抗体混于琼脂中,制板,在适当位置打孔,将抗原加入孔中扩散,与板中抗体相遇,在比例合适处呈现白色沉淀环,环的直径与抗原含量成正比。
主要用于测定血清各种Ig和补体成分的含量
单向定量免疫电泳(火箭电泳)
将一定量已知抗体混于琼脂中,制板,在板的一端打一排小孔,加入待检样品,置于阴极端进行电泳。抗原在泳动过程中与抗体在比例合适部位形成锥形沉淀峰,状如火箭,称火箭电泳。沉淀峰的高低与抗原的浓度成正比。
敏感度与单扩相仿,但需时较短。