HPLC法测定盐酸氟桂利嗪胶囊有关物质和含量.doc

HPLC法测定盐酸氟桂利嗪胶囊有关物质和含量
daojin高效液相色谱仪(xxxxxxx有限公司),FWZ800-D3B型紫外/可见分光光度计(北京瑞利分析仪器有限公司),
盐酸氟桂利嗪胶囊(自制:批号xxxxxx,xxxxxx,xxxxxx),盐酸氟桂利嗪对照品(xxxxxx制药有限责任公司提供,精制后,测定含量为:%)。
甲醇为色谱醇, 盐酸为分析纯, 水为纯化水。
2 色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-磷酸盐缓冲液(,加水溶解并稀释成1000ml,加三乙胺4ml,)(75∶25)为流动相,检测波长253nm。理论板数按盐酸氟桂利嗪峰计算应不低于3000;盐酸氟桂利嗪峰与相邻峰的分离度应符合要求。
3 方法学考察:
对照品贮备液的制备精密称取105℃,置100ml量瓶中,加乙醇10ml,振摇使盐酸氟桂利嗪溶解,加盐酸溶液(稀盐酸24ml加水至1000ml)稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;
波长选择精密量取上述对照品贮备液5ml,置50ml量瓶中,用盐酸溶液(稀盐酸24ml加水至1000ml)稀释至刻度,摇匀,在190nm至400nm的波长范围内扫描,盐酸氟桂利嗪在227 nm、253nm波长处有最大吸收。
线性关系考察精密量取对照品贮备液1、3、5、7、9、11ml,置50ml量瓶中,用盐酸溶液(稀盐酸24ml加水至1000ml)稀释至刻度,摇匀,以上述色谱条件进样测定峰面积值,结果以进样浓度为横坐标(X),以峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归,得回归方程为:
Y = X + r =
结果显示:~ ug·ml-1范围内,对照品浓度与色谱峰面积呈良好线性关系。
,供试品溶液中与对照品相应的色谱峰,;。
最小检出量在选定的色谱条件下,当信燥比为3时对最低检测限进行测定,·ml-1。
重复性和稳定性试验取样品,制成10ug·ml-1的溶液,照上述方法试验, %(n = 6),表明重复性良好。、1、2、4、6、8h测定, % , 表明供
· 1 ·
试品在8h内稳定。
精密度试验取对照品贮备液5ml,置50ml量瓶中,用盐酸溶液(稀盐酸24ml加水至1000ml)稀释至刻度,摇匀,以上述色谱条件进样测定峰面积值,%(n = 6)。
加样回收率试验精密称取已知含量的盐酸氟桂利嗪约10mg,置200ml量瓶中,精密加入105℃干燥至恒重的盐酸氟桂利嗪对照品
10mg,加乙醇20ml,振摇使盐酸氟桂利嗪溶解,加盐酸溶液(稀盐酸24ml加水至1000ml)稀释至刻度,摇匀,按供试液制备方法制备所需溶液,按上述色谱条件测定。%,R