环境工程微生物实验.doc

环境工程微生物实验
第一章微生物学实验常识
第一节微生物实验操作常识
环境工程微生物学实验课的目的是:训练学生掌握微生物学最基本的操作技能;了解微生物学的基本知识;加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时,通过实验,培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力以及实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。
一、实验过程中注意事项
,以了解实验的目的、原理和方法,做到心中有数,思路清楚。
,对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验,则需记下每次观察的现象和结果,以便分析。
,勿高声谈话和随便走动,保持室内安静。
,全部操作应严格按操作规程进行,万一遇有盛菌液试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时,应立即报告指导教师,及时处理,切勿隐瞒。
,切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇火险,先关掉火源,再用湿布或砂土掩盖灭火,必要时用灭火器。
,要求细心操作,特别爱护。对消耗材料和药品等要力求节约,用毕后仍放会原处。
,必须把所用仪器抹净放妥,将实验室收拾整齐,擦净桌面,如有菌液污染桌面或其他地方时,可用3%来苏尔液或5%石炭酸液覆盖其上半小时后擦去,如系芽孢杆菌,应适当延长消毒时间。凡带菌之工具(吸管、玻璃刮棒等)在洗涤前须先消毒(浸泡在3%来苏尔液中)。
,应标明自己的组别及处理方法,放于教师指定的地点进行培养。实验室中的菌种和物品等,未经教师许可,不得携出室外。
,应以实事求是的科学态度填入报告内容中,力求简明准确,及时汇交教师批阅。
,注意关闭门窗,灯、火、煤气等。
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二、接种室
在微生物工作中,菌种的接种移植是一项主要操作,这项操作的特点就是要保证菌种纯,防止杂菌的污染。在一般环境的空气中,由于许多尘埃和杂菌,对接种工作干扰很大,很易污染。因此,接种工作要在空气经过灭菌的环境里进行,小规模的可利用接种箱,大规模的则在接种室里操作,也可在超净工作台中操作。
(一)接种室内设备和用具
接种室内的工作台,不论是什么台面,都要求表面光滑和水平。光滑是便于用消毒药剂擦洗;水平是在倒琼脂平板时可以保证培养皿内平板的厚度一致。
在接种室(或超净工作台)安装一个紫光灯。接种室内的紫光灯,可吊在经常工作的座位的正上方。
缓冲室内应有专用的工作服、鞋、口罩、盛有来苏儿水的瓷瓶和毛巾、手持喷雾器和5%石炭酸溶液等。
接种室内有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻片、记录本、标签纸、废物筐等。
(二)接种室的灭菌消毒
:接种室使用时间较长,污染比较严重,应进行熏蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺熏蒸。熏蒸前应将接种室清扫干净,打开通气窗通风干燥。这是接种室彻底灭菌的措施。
:在每次接种前,用5%石炭酸喷雾,可促使空气中微粒及杂菌沉降,防止桌面、地面上微尘飞场,并有杀菌作用。
:有条件时在每次接种前,应开启紫外线灯,照射半小时以上(一般不必超过一小时),有较好的杀菌效果。
(三)接种室工作程序
,接种室和缓冲室内用5%石炭酸喷雾。有紫外线灯时可照射半小时。
。把所需器材搬入缓冲室。换上经常灭菌的工作服、工作帽和工作鞋(旧的衣帽鞋洗干净后灭菌即可),戴好口罩,然后用2%煤酚皂液将手浸洗2min。
,按一定位置放好。检查是否齐备。用5%石炭酸重点在工作台面上方和附近地面上喷雾,然后退回隔离室,稍停几分钟,再进接种室工作。
%酒精棉球擦手,进行无菌操作时,要严格认真,动作要轻
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缓,尽量减少空气波动,如二人操作,要相互配合好。工作时用完的火柴、废纸等,不要仍在地上,应丢道废物桶内。
,立即将台面收拾干净,将不应在接种室存放的物品和废弃物全部拿出接种室,然后用5%石炭酸全面喷射,开紫外线灯照射半小时。
。如遇棉塞着火,用手紧握即可熄火,如来不及时,应用湿布扑灭,切勿用嘴吹,以免扩大燃烧;如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时,应用抹布沾5%石炭酸收拾到废物桶内并擦拭台面或地面,用酒精棉球擦手后再继续操作。
(四)接种室空气污染情况的检验
接种室应定期进行空气污染情况的检验,其目的是了解接种室灭菌效果,另外是了解在操作过程中操作行动对空气的污染影响,