法医病理学-组织切片制作.pptx

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HE染色色切片
一、目的的要求
掌握取材材、固定定、水洗洗、脱水水、透明明、浸蜡蜡与包埋埋,切片片制作。。
(一)取取材
,,新鲜,,防止组组织腐败败。
,垂直直地切取取,严禁禁挤压或或用钳镊镊钳夹,,以免使使组织或或细胞变变形造成成人为的的破坏。。
,,lcm~3cm×1cm~~2cm×~。材材料过大大在短时时间内不不易固定定透,影影响效果果。
(二)方方法:

心脏:心房、瓣瓣膜、心心室。可可分别取取病变部部位带正正常组织织。可单单独取心心室肌,,乳头肌肌,3~5块。
肺脏:左右两肺肺(五个个肺叶));可根根据病变变需要决决定取材材块数,,特殊情情况下为为区别在在不同肺肺叶上取取材,可可用形状状做标志志在记录录时记清清楚,5~7块。
肾脏:取材包括括被膜、、皮质、、髓质和和肾盂,,应区别别左右肾肾,2~4块。
胰腺:取胰体部部,必要要时加取取胰头、、胰尾,,2块。。
肝脏:取长方形形或三角角形,2~3块。
脾脏:取材带被被膜,2~3块。
脑:全脑(桥桥脑、延延脑、小小脑)、、脊髓颈颈段及脉脉络丛,,十一块块,或根根据具体体情况决决定:
①额极;;②前后后中央回回;③海海马;④④内囊;;⑤丘脑脑;⑥枕枕叶;⑦⑦脉络丛丛;⑧桥桥脑;⑨⑨延髓;;⑩中脑脑;⑪⑪小脑。。取材时时要带上上软脑膜膜、脑室室膜或软软脊膜因因此刀要要锋利。。需要时时取脊髓髓。
垂体:前、中、、后叶和和垂体柄柄,从前前向后横横切。
::
取材时注注意方向向,取管管腔脏器器的全层层构造。。
大肠、小小肠:应考虑环环行皱襞襞,沿肠肠管的长长轴取((纵切))。
食管、气气管:横切面为为宜。
胃:常规取胃胃底。
取材后应应将被膜膜面铺在在滤纸上上,然后后入固定定液内,,防止或或减少组组织受压压变形与与收缩。。
有病变的的部位,,应附带带周围正正常组织织取材。。
二、固定定
(一)意意义:是做好切切片的重重要步骤骤之一,,如果首首次组织织固定不不良,再再重新固固定效果果不佳。。
检材固定定的关键键:取材材后尽可可能地及及时地将将所取的的材料进进行固定定,以防防止其““死后””变化的的进展,,尽力使使组织接接近于生生前状态态。为了了防止组组织结构构及成份份的破坏坏和溶解解消失,,需要使使其转变变为不溶溶性物质质,有利利于组织织结构保保存--固定的的基本意意义。
固定的的目的的:
,防防止组组织的的自溶溶与腐腐败。。
。。
,,使不不同的的组织织成份份对染染料有有不同同
亲和力力,使使细胞胞各部部易于于受色色。
,,为制制作薄薄切片片奠定定基础础。
注意::材料块块不能能过大大,固固定器器皿不不易过过小,,固定定液量量不易易过少少,应应是固固定材材料体体积的的20一30倍倍。
(二))固定定液::
根据检检验目目的不不同选选择不不同种种类固固定液液,如如糖原原检查查:不不含水水的固固定液液;电电镜检检查::锇酸酸固定定液等等;HE染染色::甲醛醛。
固定液液:用以固固定组组织的的药剂剂。
固定液液分类类:单纯纯固定定液,,由一一种药药剂组组成;;混合合固定定液((或复复合)),由由二种种以上上的药药剂组组成。。
::
①具有有强的的穿透透力,,固定定均匀匀,能能迅速速渗透透到组组织内内部使使组织织细胞胞结构构保持持生活活状态态。
②不使使组织织过度度收缩缩与膨膨胀而而变形形。
③能迅迅速使使组织织中的的蛋白白质、、糖、、脂肪肪等物物质凝凝固成成为不不溶性性物质质。
④使组组织达达到一一定的的硬度度便于于切片片制作作。
⑤价格格便宜宜,易易购买,配配制方方便。。

乙醇((酒精精)、、甲醛醛(福福尔马马林))、重重铬酸酸钾、、苦味味酸、、锇酸酸、丙丙酮、、冰醋醋酸
(1))乙醇醇(酒酒精))(alcohol)
优点::
①价格格低,,易购购买,,易溶溶于水水,使使用方方便,,95%浓浓度,,无水水乙醇醇100%%;
②市售售有两两种::100%;95%;
③能硬硬化组组织起起固定定作用用;
④也是是一种种最常常用的的脱水水剂。。
固定用用浓度度在70%%~80%%,酒酒精浓浓度愈愈大组组织收收缩愈愈严重重,浓浓度过过低起起不到到固定定作用用。
缺点::
①穿透透力小小,由由于被被固定定的组组织表表面硬硬化,,固定定液不不容易易渗透透到组组织中中去,,所以以用乙乙醇固固定的的组织织材料料要小小。
②使组组织严严重收收缩。。
③由于于酒精精能沉沉淀白白蛋白白、球球蛋白白和核核蛋白白,核核蛋白白的沉沉淀物物易溶溶于水水,使使细胞胞核核核色不不佳。。。
④溶解解脂肪肪、血血红蛋蛋白和和多种种色素素,脂脂肪染染色必必须制制作冰冰冻切切片。。