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抗心肌抗体检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
北京利米生物科技有限公司 LM-SMS-003
抗心肌抗体检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
【产品名称】通用名称:抗心肌抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Test Kit for Anti-myocardial Antibodies(ELISA)
【包装规格】 48人份/盒。
【预期用途】本试剂盒用于体外定性检测人血清中的抗心肌IgG抗体水平。
[11]主要适用于急性风湿热、心肌梗塞后综合征、病毒性心肌炎等心肌功能受损疾病患者的辅助诊断。
【检验原理】本试剂盒应用间接酶联免疫吸附实验原理。在微孔板预包被心肌抗原,加入样本稀释液及待检样本进行温育,样本中存在的抗心肌抗体与包被抗原形成“包被抗原-抗体”复合物,洗板去除不与包被抗原结合的物质;加入酶结合物(辣根过氧化物酶标记的抗人抗体)进行第二次温育,酶标二抗将与“包被抗原-抗体”复合物结合,形成“包被抗原-抗体-酶标二抗”复合物;再次洗板后加入显色剂,复合物上连接的HRP催化显色剂反应,生成蓝色产物。终止反应后,变为黄色。若样本中无抗心肌抗体,不显色或
很浅色。
【主要组成成分】
【储存条件及有效期】
1. 储存条件:2~8℃避光贮存。
2. 有效期:12个月。
3. 打开后的包被板条用自封袋密封,2~8℃避光贮存不超过2周。
【适用仪器】含波长450nm的酶标仪。
【样本要求】
1. 本试剂使用的样本为人血清。
2. 不能检测含有叠氮钠的样本,因叠氮钠抑制辣根过氧化物酶的活性;不能检测含有悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血的样本。
3. 样本中应无微生物。无菌分离的样本可在2~8℃贮存1周,低于-18℃贮存三周,避免反复冻融。
4. 使用前请将样本置于室温(10~30℃)平衡30分钟以上,冷冻样本实验前需解冻至室温(10~30℃)并混匀。
【检验方法】
1. 配液: 用蒸馏水或去离子水将1瓶浓缩洗涤液全部稀释至450ml。
2. 样本稀释:取90μl生理盐水于塑料试管中,再加10μl样本混匀。阴、阳对照已经1:10 稀释可直接使用。
3. 编号: 将样本对应的微孔按序编号,每板设阴性对照3孔、阳性对照
2孔和空白孔1孔(双波长测定可不设空白孔)。
4. 加样: 每孔加100μl(或2滴)样本稀释液,空白孔不加。分别在相应的孔中加稀释过的样本或阴、阳对照10μl,轻轻振荡混匀。
5. 温育: 用封板膜封板后放入37±1℃温箱温育45±1分钟。
6. 洗涤: 小心揭掉封板膜,用洗板机洗涤5次(也可手工洗板),每次浸泡30秒,洗涤时各孔均需加满洗涤液,最后一次在吸水纸上尽量拍干。
7. 加酶: 摇匀后每孔加100μl(或2滴)酶结合物,空白孔不加,轻轻振荡混匀。
8. 温育: 用另一张封板膜封板后放入37±1℃温箱温育30±1分钟。
9. 洗涤:操作同第6步。
10. 显色:每孔先加50μl(或1滴)显色剂A,然后加50μl(或1滴)显色剂B(包括空白孔),37±1℃避光显色10±1分钟。
:每孔加50μl(或1滴)终止液终止反应,轻轻振荡混匀,10分钟内在波长450nm下分别测定各孔的吸光值A值。
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