凝胶渗透色谱.ppt

凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography)
2010年12月7日
主要内容
基本原理
多糖分析用色谱柱 TSK GEL
实验室GPC系统特点
实验注意事项
GPC 色谱系统(SEC)
组成:输液泵、进样器、色谱柱、检测器和计算机数据处理系统。
分离原理体积排阻色谱(SEC)(Size Exclusion Chromatography)
高分子GPC色谱图
P5
P10
P800
P400
P200
P100
P50
P20
(a)
(b)
普适校正原理

GPC对聚合物的分离是基于分子流体力学体积。
两种柔性链的流体力学体积相同:
[η]1M1=[η]2M2 k1M1α1+1=k1M2α2+1
两边取对数:
lgk1+(α1+1)lgM1=lgk2+(α2+1)lgM2
即如果已知标准样和被测高聚物的k、α值,就可以由已知相对分子质量的标准样品M1标定待测样品的相对分子质量M2。
填料要求:分辨率高,良好的化学稳定性、热稳定性,不与高分子发生反应,有一定强度、不易变形等.
填料种类:有机填料:交联PS凝胶
交联聚醋酸乙烯酯
交联葡萄糖凝胶
交联聚丙稀酰胺
无机填料:多孔性硅胶
多孔性玻璃
色谱柱: GPC设备最关键材料之一
TSK-GEL PWXL 色谱柱
该色谱柱由刚性、球形、亲水的多孔甲基丙烯酸酯构成,适用于以凝胶色谱的模式分析分离蛋白质、多肽、多糖、寡糖、DNA、RNA等。pH适用范围为2-12;可使用含有50%的混合有机溶剂为流动相;使用温度可达80℃。填料虽呈微弱的负电性,但是对于分析分离非离子、阴离子和大多数的阳离子型样品没有任何影响
TSK-GEL PWXL系列色谱柱填料的种类及特性
Waters 515泵
流速范围:-10mL/min
流速精度:%
耐压:6000 psi
色谱柱应用:分析柱、微柱
目前最耐用,性能最好的分析型高压液相色谱泵