微生物细胞数的计数实验.doc

微生物细胞数的计数实验.doc实验二
《微生物细胞数的计数》
标准实验报告
适用专业: 环境工程
江苏科技大学生物与化工学院环境工程系
2012年 8 月
一、实验目的
;

二、实验要求
,听从指导教师安排;
,不懂就问;

三、实验仪器和材料
显微镜、血球计数板、移液管、盖玻片、吸耳球、酵母菌液(或其他微生物材料)等
四、血球计数板的结构
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,,其中间又被一短横槽隔为两半,,,,,即1mm×1mm×;大方格的长和宽各2mm,,,即2mm×2mm×,刻有一些符号和数字,其含义是:XB-K-25为计数板的型号和规格,表示此计数板分25个中格;;1/400mm2表示计数室面积是1mm2,分400个小格,每小格面积是1/400 mm2. 
计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成.
×25型的计数板  将计数室放大,可见它含16中格,一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格),,,依下列公式计算:
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
×16型的计数板  中央大方格以双线等分成25个中方格,每个中方格又分成16个小方格,(80个小方格),,依下列公式计算:
酵母细胞个数/1mL =80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
五、实验步骤及内容
1. 取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加盖玻片.
2. 取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡.
3. 静止5min后,用低倍镜观察并将计数室移至视野中央.
4. 在高倍镜下计数:随机计数五个中格的平均值,(或25)就得出一大格中的总菌数,最后再换算到每mL菌液中的含菌数.
酵母菌细胞数/mL=

(X1+X2+X3+X4+X5)
5
×25(或16) × 10 × 1000 × 稀释倍数
计数区如下:
六、数据整理
七、实验过程中应注意事项及心得
,要将试管轻轻震荡几下,这样使酵母菌分布均匀,防止酵母凝聚沉淀,提高计数的代表性和准确性,求得的