金线莲组培快繁技术研究论文.doc

金线莲组培快繁技术研究论文.doc金线莲组培快繁技术研究论文
.freelg/L +~ mg/L,;壮苗最适培养基为1/2MS+ mg/L+6-BA mg/L+香蕉提取物20%(或椰子汁20%);试管苗移栽适宜的基质为菜园土1份+2~3 mm粗砂2份(或1份)+木屑1份(或2份),3个月成活率均达100%.freelin,然后用流水冲洗30 min。在超静工作台前,用75% 酒精湿润5~6 s,%的HgCl溶液灭菌12~13 min,用无菌水冲洗5~6次。将消毒好的茎按上段(具茎尖)、中段和下段(匍匐茎段)~2 cm,带有1~2个节间的小段,分别接种于MS+6-BA mg/L +NAA mg/L 培养基上,,%,%。培养条件为:温度(25±2)℃,光照时间12 h/d,光照强度1 500~2 000 lx。
不定芽诱导
基本培养基对不定芽诱导的影响采用单因素实验,培养基选用MS(Murashige-Skoog)[3],1/2MS(大量元素减半,其他成分不变),Viller Ojima)和KC(Knudson C)等5种,分别添加6-BA ,NAA mg/L。
激素对不定芽诱导的影响以MS为基本培养基,添加不同种类及浓度的细胞分裂素和生长素。

上述实验选取无菌健壮植株,切取长约1~ cm,带有一个节间的茎中段,每处理接10个茎节,重复3次。培养期间定时观察不定芽生长情况,培养60 d后统计不定芽数。其它条件同实验“”项。
壮苗培养
激素对幼苗生长和发根的影响以1/2MS为基本培养基,NAA设1~5 mg/L 5个处理,6-, mg/L 3个处理,共15个处理。
添加物对幼苗生长和发根的影响以1/2MS+NAA mg/L+6-BA mg/L为基本培养,考察马铃薯提取物、香蕉提取物、苹果提取物、椰子汁等4种天然有机物和活性炭对金线莲幼苗生长的影响。

上述每种培养基均接入经增殖培养高约3 cm,具3~4节间、有1~2片的无根幼苗,每处理接种接无根幼苗10株,重复3次。培养后每隔15 d观察生长情况1次,至3个月考察每株净增加的叶片数、重量及发根数,并进行数理统计分析。
移栽选苗高约6~8 cm,茎基直径约2 mm,丛生根有2~3条的试管苗,炼苗4 d后,洗净附着在植株上的培养基,并晾干洗涤水后移人直径为15 cm,装有不同基质的土盆中,考察不同基质对金线莲试管苗成活率的影响。移栽前,实验基质均用45%多菌灵可湿性粉剂800倍溶液浇透消毒。实验条件为遮荫度80%的荫棚,保持空气相对湿度的80%~90%。如发现有病死植株,及时拔除。每处理5盆,每盆种5株,重复3次,移栽3个月后考察成活株数,并进行数理统计分析。
2 结果
无菌繁殖体系的建立实验表明,外植体茎段的分化程度对诱导结果存在一定的影响。从表1可知,上、中段茎均能萌动生长。上段茎因有顶芽的存在,顶端优势表现较为强烈,因而以生长为主,不定芽发生较少,;中段茎不定芽发生快、量大、