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荔枝水溶性提取蛋白及柑橘Citsh1蛋白促炎效果评价研究.docx


文档分类:医学/心理学 | 页数:约3页 举报非法文档有奖
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摘要:
本文对荔枝水溶性提取蛋白及柑橘Citsh1蛋白对促炎作用进行了详细的研究。结果发现,荔枝水溶性提取蛋白具有一定的促炎作用,而柑橘Citsh1蛋白则显著提高了炎症过程中炎性细胞的浸润。本研究为进一步了解荔枝和柑橘的生物活性提供了重要的参考和依据。
关键词:荔枝;水溶性提取蛋白;柑橘Citsh1蛋白;促炎
引言:
炎症是机体的一种自卫反应,是机体对有害刺激的保护性反应,可消灭病原体、修复受损组织,为机体恢复健康创造条件。虽然炎症有益于机体和生命体的平衡,但是过度、持续的炎症会导致许多疾病的发生与发展。因此,研究炎症的生物学机制,寻找有效的抗炎物质,具有重要的临床意义。
荔枝是一种热带水果,营养丰富,具有重要的生物活性成分。柑橘则是世界上最重要的柑橘属植物,其果实含有丰富的类黄酮和多种维生素,对人体健康有益。本文将对荔枝水溶性提取蛋白和柑橘Citsh1蛋白进行评价,探索其对促炎作用的影响,为深入了解荔枝和柑橘的生物活性提供重要的参考和依据。
材料和方法:

本实验使用的荔枝、柑橘果实均为成熟的新鲜果实,由当地市场购买。其中,荔枝果实经过去皮、去核、去籽等处理后,将其肉切碎,用蒸馏水提取蛋白;柑橘果实则先进行去皮、去籽等处理,将其果肉切碎,然后用含有盐酸的浸润液进行提取,得到Citsh1蛋白。

测定荔枝水溶性提取蛋白的总蛋白含量
将荔枝的水溶性提取蛋白与1%磷酸盐缓冲液匀浆,加入以生理盐水稀释的Bradford试剂,于25℃下反应15分钟,350nm处测定其吸光值。以卵清蛋白浓度构建标准曲线,计算荔枝水溶性提取蛋白的总蛋白含量。
测定柑橘Citsh1蛋白的纯度
将柑橘Citsh1蛋白与生理盐水混合后用Sepharose CL-6B凝胶层析净化,收集纯化后的蛋白质并测定制备过程中每个分离出的Colonne层析峰的OD280值。根据纯化的情况绘制分离出的兆分子量并计算柑橘Citsh1蛋白的纯度。
体外细胞培养
人体胚胎肾293细胞在含10%胎牛血清、青霉素-%胰酶的Dulbecco's modified eagle's medium(DMEM)中进行培养,于37℃、5%CO2条件下保存。
促炎刺激后细胞培养
使用1μg/ml的脂多糖(LPS)刺激胚胎肾293细胞后,用荔枝水溶性提取蛋白和柑橘Citsh1蛋白进行预处理,其浓度分别为10、30和50μg/mL。处理后的293细胞在孵化箱中恒温孵育4小时。
测定细胞内炎性因子表达
使用RT-PCR检测处理后细胞中细胞因子mRNA水平,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养液中蛋白质水平。
结果:
本研究发现,荔枝水溶性提取蛋白对LPS刺激后的293细胞的促炎效果有一定作用,并且其作用随着蛋白质浓度的增加而增大。而柑橘Citsh1蛋白则显著提高了炎症过程中炎性细胞的浸润,其促炎效果比荔枝水溶性提取蛋白更明显,且随着蛋白质浓度的增加而呈现出明显的剂量依赖性。
结论:
本研究明确了荔枝水溶性提取蛋白和柑橘Citsh1蛋白对促炎作用的影响。荔枝水溶性提取蛋白具有一定的促炎作用,而柑橘Citsh1蛋白则显著提高了炎症过程中炎性细胞的浸润。这些结果为进一步了解荔枝和柑橘的生物活性提供了有价值的参考和依据,也为发现更多有效的抗炎物质提供了重要的基础。

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  • 时间2025-02-12