滤纸法酶活测定
接种,根据不同的菌种配所需的培养基,本实验中C24,M1,MM01,BJJ,MQM为PDA培养基,F8,FN6,,FN11,FN12,FN*,C10为LB培养基。在无菌条件下将其接种于以灭菌的液体培养基里,每个菌种做三个重复。
培养,将其放置于相同环境摇菌培养,适宜温度为28℃左右,边培养边观察生长情况。
离心,取对数期的培养液,培养液经3500r/min离心10min,,一组为实验组,一组为对照组,,将实验组预热到50℃,将对照组沸水浴灭活5min,用水冷却,再将其放入50℃水浴锅。再向实验组和对照组分别加入1×6cm新华滤纸一条50℃水浴保温1h取出,水浴灭活5min,用3mlDNS显色后稀释3倍。
测OD值,首先以水为空白对照,分别测上述实验组和对照组的OD值,再以上述灭活酶液(即对照组)为对照测其对应的实验组的OD值,记录数据,求三个重复测得的平均值,即为最终所需OD值,数据记录如下:
菌种
重复
以水为对照
以灭活酶液为对照
平均值
FN7
细菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
FN*
细菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
FN12
酵母菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
F8
细菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
FN11
细菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
FN6
酵母菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
FN10
细菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
C24
放线菌
实验1
对照1
实验2
对照2
实验3
对照3
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