一、目的和要求掌握了解食用菌组织分离的方法和实际操作技术,明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重要性。二、材料和用具试管斜面PDA培养基、平菇较成熟的子实体、酒精灯、接种针、75%酒精,升汞、火柴以及恒温培养箱、无菌操作台、解剖刀等。三、原理在食用菌生产中采用组织分离的方法繁殖母种是大多数菌类普遍采用的方法,而组织分离成功与否是与种菇子实体的选择、分离过程中的操作方法等分不开的。这直接关系到所繁菌种的优劣。因此食用菌组织分离是食用菌生产中的重要环节之一。四、分组以班为单位,每个同学接种2支试管母种(平菇)。采用菌盖与菌柄交界处组织进行分离和菌盖带菌褶部分进行组织分离。五、方法与步骤1、选菇平菇选朵大肉厚的作种菇。2、种菇消毒将选好的种菇剪去过长的菌柄,放入接种箱内进行消毒种菇均用75%的酒精擦洗菌盖、菌柄。然后再用升汞擦洗消毒。3、组织分离接种用无菌解剖刀从菌柄中部纵向切开,或把种菇撕开,在菌盖与菌柄交界处或菌盖带菌褶部分挑取一小块组织,移接到试管PDA培养基上。4、菌种培养及保存置28℃左右温度下培养3~5天就可看到组织上产生白色绒毛状菌丝,并向培养基上生长。菌丝长满斜面后,管口用塑料薄膜或防潮纸包扎,即可放入5℃电冰箱中保藏。六、作业根据观察结果比较同一菌种不同部位组织分离后菌丝生长情况,评价何种部位更适宜该菌种的组织分离繁殖,并对操作的各个环节提出改进建议。
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