方格孢子粉检测报告.docx

方格孢子粉检测报告国家食品药品监督管理局保健食品产品技术要求 BJGXX0697 方格牌破壁灵芝孢子粉fanggepaipobilingzhibaozifen 【配方】灵芝孢子粉【生产工艺】本品经干燥、粉碎、分装等主要工艺加工制成。【感官要求】应符合表1的规定。表1感官要求【鉴别】无【理化指标】应符合表2的规定。表2理化指标 1破壁率的测定原理:单位质量样品未破壁孢子数与同单位质量标样中的孢子数之比为样品中孢子的未破壁率。破壁率=1-未破壁率。未破壁率孢子表现为完整的卵形且外壁光滑。标样配制与计数:精密称取标样,稀释至100mL。充分搅拌均匀,立即取少许悬浮液均匀涂抹在血球计数板框内,盖上玻片。在显微镜下观察,计数,一般每一检样观察不少于50个视野。样品测定:同上结果计算 W0×n X=视野中的孢子总数; n—标样50个视野中的完整未破壁孢子总数。附:在无未破壁孢子予以对照的情况下,可用下面方法检测破壁孢子计算其破壁率。按项操作步骤,每检测样分别计破壁和未破壁孢子数。观察视野数根据破壁情况自行调整,一般不少于10个视野。在视野下的破壁孢子表现为不呈完整卵形的大小不等形状各异的碎片,或表现为外壁粗糙的卵形个体。破壁孢子数=碎片数/相当于一个完整孢子的碎片数+外壁粗糙的卵形体数。未破壁孢子数=完整卵形且外壁光滑的个体数P破破壁率%=×100P破+P未破式中: P破:所观察的视野下破壁孢子数总和; P未破:所观察的视野下未破壁孢子数总和n:观测视野数总和; 测一个平行样,得出破壁率后取两破壁率的平均值。【微生物指标】应符合表3的规定。表3微生物指标【标志性成分含量测定】应符合表4的规定。表4标志性成分含量测定 1粗多糖的测定仪器分光光度计离心机旋转混匀器试剂除特殊注明外,本方法所用的试剂均为分析纯;所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。无水乙醇乙醇洗涤液:20mL水中加入无水乙醇100mL,混匀。硫酸苯酚溶液:称取精制苯酚,加水溶解并稀释至100mL,混匀。溶液置冰箱中可保存1个月。葡萄糖标准溶液:准确称取经过98~100℃干燥至恒重的葡萄糖,加水溶解后以水稀释至1000mL,此溶液1mL含葡萄糖1mg,用前稀释10倍,现用现配。标准曲线的绘制:精密移取葡萄糖标准溶液0、、、、、、, 分置于具塞试管中。加蒸馏水补充至体积,再加苯酚溶液,摇匀,依次加入浓硫酸,摇匀,置沸水浴中2min,取出置室温,于485nm波长处,以试剂空白溶液为参比测定吸收度。以含糖量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。样品处理:称取样品,置圆底烧瓶中,精密加水100mL,称定重量,分散均匀后加热回流3h,放冷,再称定重量,加水补足减失的重量,摇匀,静置数小时,取上清液供沉淀多糖。准确吸取以上清液,加入无水乙醇25mL,摇匀,4℃静置过夜,以4000r/min离心15min,弃去上清液。沉淀用水溶解并定容至,混匀后供测定用。样品测定:吸取供试品溶液,加水补充至,再加苯酚溶液,摇匀,依次加入浓硫酸,摇匀,置沸水浴中2min,取出置室温,于485nm波长处,以试剂空白溶液为参比测定吸光度值。结果计算 m1×V1×V3X=——————m×V2×V4式中: X—样品中粗多糖含量,mg/g;m1—测定用样品溶液中相当葡萄糖的量,mg;m—样品质量,g; V1—样品提取液总体积,mL; V2—沉淀粗多糖所用样品提取液体积,mL;V3—样品测定液总体积,mL;V4—测定用样品液体积,mL。 2灵芝三萜的测定原理:将样品溶于乙酸乙酯中并于100℃水浴上蒸干后,加入5%香草醛-冰乙酸溶液和高氯酸,于65℃水浴加热15min,再加入冰乙酸,用分光光度计测定样品中的三萜含量。仪器:分光光度计±2nm试剂齐墩果酸标准品:纯度%,购自中国食品药品检定研究院。高氯酸:分析纯冰乙酸:分析纯香草醛:分析纯乙酸乙酯:分析纯对照品溶液的制备与标准曲线的绘制:精密称取齐墩果酸对照品一定量,置于容量瓶中,用乙酸乙酯溶解,超声15min并稀释至刻度,摇匀,制成/mL的对照品溶液。分别吸取、、、、、和对照品溶液,于100℃水浴上蒸干后放置室温,加入%香草醛-冰乙酸和高氯酸,在65℃水浴中加热15min并移入冰水浴中冷却3min,取出放置室温,再加入冰乙酸,摇匀并置于室温。15min后用分光光度计于552±2nm波长处测定对照品溶液的吸光度值。分别以浓度和吸光度值绘制标准曲线。样品溶液的制备与测定:取样品约,精密称定,置100mL容量瓶中,用约85mL乙酸乙酯溶解,超声30min,过滤,少量乙酸乙酯淋洗滤渣,定容至刻度,摇匀。吸取1mL该溶液,于100℃水浴上蒸干后放置室温,加入%香草醛-冰乙酸和高氯酸,在65℃水浴加热15min并移入冰水浴中3min,取出放置室温,再加入冰乙酸,摇匀并置于室温。15min