H-E染色.doc

薄H-E染色螁概述螈苏木精(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色也称普通染色,简称为H-E染色。是生物组织学、病理学及细胞学工作必不可少的最常用的染色方法,故又称常规染色肄H-E染色应该是红蓝相映,层次浓淡均为分明稳恒定优质莄各种固定、包埋方法所制作的组织切片和冰冻切片等,均可用采用常规染色袂H-E染色原理羇组织细胞的不同成分对苏木精染料的亲合力不同,经苏木精染色的组织切片,再利用酸乙醇的分化作用,可使细胞核等酸性成分着色清晰,而其它成分脱色螇再经伊红染细胞质等碱性成分,则各种组织与病变的一般形态结构均可显示出来肄一张优质的染色切片,可以清晰地观察到各种不同的组织结构以此作为病理诊断的确切依据蚀再根据此染色切片所见,分别进行不同的特殊染色艿到目前为止人类所积累的病理组织学知识,绝大部分是从观察苏木精-伊红染色标本所得来的膇第一节染液及溶液的配制袅一、明矾苏木精染液的配制蚁苏木精染液的配法很多,普通、常规染色多用明矾苏木精,常用的有哈瑞(Harris)、埃利希(Ehrlich)、德拉菲而德(Delafield)及迈耶(Mayer)等莇明矾苏木精染液用钾明矾或铵明矾中的铝离子作为苏木精的媒染剂薆利用氧化汞等氧化剂进行人工氧化或通过自然氧化成熟的方法,使苏木精具有较强的染色效果芁还需用冰醋酸作为促染剂,以增强染色能力螂(一)哈瑞斯(Harris)(1)甲液肁苏木精1g薀无水乙醇10ml袈(2)乙液蒅钾明矾(硫酸铝钾)20g螂蒸馏水200ml蚁(3)~~、乙液,将乙液(加温并搅拌),待全部溶解后,再加入甲液,混合后煮沸1~2分钟,然后改用小火加温,慢慢加入氧化汞,同时不停地摇荡或搅拌使其充分氧化,当液体变为深紫蓝色时,即迅速将容器放入入冷水中使之迅速冷却,室温静置数小时至一夜。第二天过滤,~1毫升冰醋酸,以增强其染色力荿染色时间为3~15分钟芄此液为人工氧化剂,配制方便,配后第二天即可应用,且染色时间较短,为临床病理常用之方法,保存时间不能太长,经2~6个月后染色作用渐弱,故现用现配为好,一次不宜配制过多,应按需要量随用随配芃钾明矾为媒剂,氧化汞为氧化剂,冰醋酸为促染剂蒀二、伊红染液的配制蒇为砖红色粉末状或酱红色结晶,是最常用的胞浆染料羇伊红有水溶性和醇溶性,黄光(Y)与蓝光(B)%~1%。%~%;快速染色时或偶尔遇到对伊红着染困难的组织,%~1%袀浓度较低的易使胞质染色均匀,色调清晰、美观莆(-)水溶性伊红染液螃(二)%%醇溶性伊红染液袆(1)配方蒄醇溶性伊红(B)%乙醇200ml芅(2)配制法芄先将伊红溶于蒸馏水中,待其溶解后摘冰醋酸于其中,有沉淀生成,至成浆糊状,再加蒸馏水数毫升,继续滴冰醋酸,直至沉淀不再增加。过滤,弃滤液留沉淀物,待其干燥后,溶于200毫升95%(1)配方蚄伊红(水溶性Y)1g羅蒸馏水200ml艿冰醋酸30ml薇(2)配制法膄将伊红溶于蒸馏水100ml中,然后边摇边滴冰醋酸,待伊红呈浆糊