孔雀石绿.doc

乙腈(色谱纯)、二氯甲烷(分析纯)、甲醇(色谱纯)、超纯水:,用前过滤;;乙酸盐缓冲液:-甲苯磺酸溶解于950ml水中,,最后用水稀释到1L;20%盐酸羟胺溶液;-甲苯磺酸:-甲苯磺酸,并用水稀释至100ml;二甘醇(分析纯);中性氧化铝:(80~120目);标准品:孔雀石绿(MG)、无色孔雀石绿(LMG),纯度大于97%;标准溶液:准确称取适量的无色孔雀石绿,用乙腈分别配制成100μg/ml的标准贮备液,再用乙腈稀释配制1μg/ml的标准溶液。于4℃冰箱中避光保存;标准工作溶液:用乙腈逐步稀释标准贮备溶液,配制成20ng/ml无色孔雀石绿标准溶液前处理:,,%的盐酸羟胺溶液、-甲苯磺酸溶液、,用匀浆机以10000r/min的速度均质2min,静置15min。加入10ml乙腈,漩涡混和2min,4500r/min离心15min,将上清液转移至另一离心管中。在样品离心管中加入10ml乙腈,重复上述操作,合并乙腈层。加入5g中性氧化铝,振荡1min,1500r/min离心5min,将上清液转入250ml分液漏斗中。向氧化铝沉淀中加入5ml乙腈,振荡1min,1500r/min离心5min,上清液合并至分液漏斗中。向分液漏斗中加入15ml二氯甲烷、2ml二甘醇,剧烈振荡1min,静置分层,将二氯甲烷层转移至100ml的梨形瓶中,再用10ml二氯甲烷重复上述操作两次,合并二氯甲烷层于100ml梨形瓶中,于45℃旋转蒸发至近干,。将中性氧化铝柱安装在固相萃取装置上,用5ml乙腈活化。待乙腈液面降至柱床上1~2mm时,将梨形瓶中的溶液转移到固相萃取柱中,再用乙腈洗涤瓶两次,,把洗涤液依次通过柱,,最后用2ml乙腈淋洗,收集全部流出液,用乙腈定容至5ml,,滤液供液相色谱测定。