实验室常用试剂、缓冲液的配置方法.doc

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1MTris-HCl(,,)组份浓度:1MTris-HCl配制量:1L配制方法:。,充分搅拌溶解。。。,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,。10×TEBuffer(,,)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配制方法:,置于1L烧杯中。,均匀混合。,高温高压灭菌。。-HCl()组份浓度:-HCl配制量:1L配制方法:。,充分搅拌溶解。。。,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,。3M醋酸钠()组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:·3H2O置于100-200ml烧杯中,,室温保存。PBSBuffer组份浓度:137mMNaCl,,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:,置于1L烧杯中。,充分搅拌溶解。,然后加入去离子水将溶液定容至1L。,室温保存。注意:上述PBSBuffer中无二价阳离子,如需要,。10M醋酸铵组份浓度:10M醋酸铵配制量:100ml配制方法:~200ml烧杯中,加入约30ml的去离子水搅拌溶解。。。。注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。Tris-HCl平衡苯酚配制方法::大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,,苯酚平衡操作方法如