发酵液的预处理和固液分离方法山东农业大学孙中涛预处理和固液分离的目的:1、分离细胞、菌体和其它悬浮颗粒(细胞碎片、核酸和蛋白质的沉淀物)。 2、除去部分可溶性杂质。 3、改变滤液的性质(降低粘度等),以利于后继操作。总策略:1、胞外产物:应尽可能转移到液相中,常用调pH至酸性或碱性的方法来达到。 2、胞内产物:首先收集细胞、破壁,生化物质释放到液相,再分离细胞碎片。 3、通常,以含生化物质的液相为出发点,进行后继操作。一、发酵液的预处理1、改变液体物理性质,促进固液分离。细菌及某些放线菌菌体细小,发酵液粘度大,不能直接过滤,由于菌体自溶,核酸、蛋白质及其它有机粘性物质的存在会造成滤液浑浊,滤速极慢,因此,在预处理中应采用絮凝或凝聚的方法,设法增大悬浮报中固体粒子的大小,提高其沉降速度,或采用稀释、加热等方法降低粘度,以利于过滤。必要性:2、发酵液杂质很多,其中影响最大的是高价无机离子和杂蛋白,预处理时,应尽量除去。高价无机离子危害:在采用离子交换法提炼时,影响树脂的交换容量。杂蛋白质的危害:a)离子交换法和大网格树脂吸附法提炼时,会降低吸附能力,b)萃取时,易产生乳化。c)过滤或膜过滤时,使滤速下降,膜受到污染。(一)、高价无机离子的去除方法宜加入草酸。草酸溶解度小,用量大时,可用其盐,如草酸钠。草酸钙能促使蛋白质凝固,提高滤液质量。草酸的回收:四环类抗生素废液中,加入硫酸铅,在60℃下生成草酸铅。后者在90-95℃下用硫酸分解经过滤、冷却、结晶后可回收草酸。1、去除钙离子: 2、除去镁离子:加入三聚磷酸钠,它和镁离子形成可溶性络合物:用磷酸盐处理,也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。此法可用于环丝氨酸的提炼。3、除去铁离子:可加入黄血盐,使形成普鲁士蓝沉淀。(二)、杂蛋白的去除方法蛋白质等电点多在pH ,此时溶解度最小。但单靠等电点法不能将大部分蛋白质除去。在酸性溶液中,蛋白质能与一些阴离子如三氯乙酸盐、水杨酸盐、钨酸盐、苦味酸盐、蹂酸盐、过氯酸盐等形成沉淀。在碱性溶液,蛋白质能与一些阳离子,如Ag1+,Cu2+,Zn2+,Fe3+和Pb2+等形成沉淀。等电点法:
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