蕲蛇蛇毒中一个新的类凝血酶的分离纯化与表征.doc

蕲蛇蛇毒中一个新的类凝血酶的分离纯化与表征蕲蛇蛇毒中一个新的类凝血酶的分离纯化与表征第6卷第1期2002年3月生命科学研究?',郭春腾,邓文汉,卢菀华,宁千年,饶平凡(,中国福建福州3513002;,中国福建三明365004)摘要:使用DEAE—SephadexA-50,POROS50HS及FOROS20PI等色谱分离技术,从蕲蛇粗毒中分离提纯得到1个具有凝血活力的组分,经SDS-PAGE和PAGE检测均为一条带,非还原条件下相时分子质量243kDa,还原条件下相对分子质量330kDa;其凝血活力为910NIHu/mg谊组分不具有教活因子X?的活性,肝素不影响该组分的凝血活性,EDTA部分抑制其活性,革甲基磺酰氟(PMSF)则套产生不可逆抑制作用谊酶N一束端氨基酸序剐为VIGGNGXDINEHRFLVAFF,经分析表嚼馈酶是一种新的类艇血酶关键词:蛇毒;类凝血酶;分离纯化;表征;N一束端氨基酸序剐中图分类号::A文章编号:1007—7847(2002}01一(~1-04PurificationandCharacterizationofaNovelThrombm—likeEnzymefromAgk/strodonacutusVenomLAIWei—ping,GUOChun-teng,DENWen—han,LUWan—hua.,NINGQia~~,RAOPing-fan(,,Fuzhou3500ff2,nn,China2伍血n:Co,s口365O13O,F~9:/an,Ch/na)Abstract:~wasidentifiedandisolatedfromAgk/str,~onacu~thsvenombyanion—ex—changechromatography(DEAE-SephadexA-50),followedbycation—exchange(POROS50HS)andanion—exchangechmmatography(POROS2OP1).Theenz~xnewithfibrinogen—clottingantivi~-Waspurifiedtohomogeneitydeter-minedbySDS—PAGEandPAGE,themolecularweightofwhichW;-~n———temainalaminoacidsequenceofthepurifiedenz~TneWasidentifiedasVIGGNGX—DINEHR?:s~akevenom;thrombin—likeellzyn3~;purification;daaractefization;N—terminalaminoacids~qllence(厶ScienceRe.~,6(1):O64,067)蛇毒中的类凝血酶,能够催化纤维蛋白原分子的特定部位Arg-Gly肽键的裂解,释放出血纤肽而转化为纤维蛋白,其作用与血浆凝血酶十分相似它在体外引起血浆纤维蛋白原凝聚,起凝收稿日期:2001—;修回日期:0?—25基盒项目:福建省科技厅资助项目(2I]00ZI43)作者简介:赖伟苹(I977.).女,福建永定人,蛋白质化学硕士研究生;郭春腾(1969-),男,福建仙游人,工程师:饶平凡(1957)^.福州大学教授,博士生导师,主要从事蛋白质化学研究第1期赖伟苹等:蕲蛇蛇毒中一个新的类凝血酶的分离纯化与表征血作用;但在体内由于不激活因子瑚,所以由它水解而生成的纤维蛋白凝块没有侧链交联,容易被纤维蛋白酶降解,造成体内纤维蛋白原浓度降低而表现为抗凝效应.,类凝血酶的这种特性使其在临床上可以作为很好的去纤蛋白生成剂,除去血液中